Власенко В.В., Мартинюк О.М.,
Соломон А.М.
Секція Біологічні науки.
Підсекція
Мікробіологія
Вінницький державний
аграрний університет.
Визначення
ефективності дослідного середовища для культивування молочно-кислих бактерій.
Пробіотичні
властивості бактерій роду Lactobacillus в даний час широко використовується в якості
регуляторів стану нормальної мікрофлори шлунково- кишкового тракту в
птахівництві, тваринництві і в медицині [1,3,6].
Препарати молочно-кислих бактерій
позитивно впливають на стан здоров’я людини і тварин, пригнічують розмноження
умовно патогенних і не патогенних мікроорганізмів.
Їх використовують в якості лікарських засобів і харчових
добавок-препаратів, що містять в собі живі клітини деяких бактерій роду Lactobacillus, і тому являється
актуальним і перспективним з точки зору як профілактики так і лікування
дизбактеріозів при порушенні балансу нормальної мікрофлори, так і виготовлення
препаратів, що піддержують захисні сили організму [2,4,5]. Молочно-кислі
бактерії мають високу ферментативну активність, що дозволяє суттєво стимулювати
і регулювати травлення, надавати імунологічну, проти алергічну і антитоксичну
дію на організм людини і тварин.
Метою нашої роботи була розробка поживного
середовища та визначення оптимальних умов для культивування мікроорганізмів
роду лактобактерій.
Матеріали та методи досліджень
В
дослідженнях були використані штами бактерій роду лактобацил. Культивування
молочно-кислих бактерій проводили на контрольному і дослідному середовищі, в
якості контрольного середовища використовувалося стандартне середовище MRS, а дослідним слугувало
наше нове розроблене середовище.
Культивування молочно-кислих бактерій для визначення росту проводили при
37°С на рідких поживних
середовищах MRS
(контроль) і на запропонованому дослідному середовищі.
Облік результатів
проводили по загальноприйнятій схемі на рідких поживних середовищах за допомогою вимірювання оптичної щільності
на фотоелектрокалориметрі КФК-3 в залежності від часу культивування.
Результати досліджень
В процесі вивчення поживного середовища
встановлено, що ріст мікроорганізмів залежить від рН поживного середовища. Чим
вище рН середовища тим менша кількість молочно-кислих клітин розвивається в поживному
середовищі. Результати досліджень
наведені в Таблиці 1
Таблиця 1
Вплив початкового рН поживного
середовища на ріст молочно-кислих
бактерій.
|
Початкове значення рН |
Кількість клітин,106
кл/ мл |
|||
|
М±m |
% від max |
|||
|
контроль |
дослід |
контроль |
дослід |
|
|
5,5 |
275±3,3 |
283±2,8 |
55,4 |
56,3 |
|
6,0 |
288±23,2 |
290±22,0 |
58,1 |
59,1 |
|
6,5 |
475±3,5 |
480±3,3 |
95,8 |
97 |
|
7,0 |
496±26,0 |
500±25,0 |
99 |
100 |
|
7,5 |
450±21,4 |
460±20,0 |
90 |
92 |
|
8,5 |
10±4,5 |
12±4,1 |
2 |
3 |
Як видно з результатів
досліджень ( Табл. 1) рН дослідного середовища було від 5,5 до 8,5,
в результаті статистичної обробки отриманих результатів виявилося, що
найінтенсивніший ріст відзначався при рН 6,5-7,5. Слід зазначити, що
максимальне накопичення культур спостерігалось при рН-7 (контроль 496 ± 26,0;
дослід 500 ± 25,0 клітин). Найменша концентрація мікроорганізмів в поживному
середовищі спостерігалась при рН-8,5.
Отримавши позитивні результати по
визначенню оптимальних умов рН ми приступили до визначення можливих
температурних режимів вирощування молочно-кислих бактерій на запропонованому середовищі.
В дослідах інкубацію посіяних культур
проводили при температурі 32°С-мінімальна та 50°С-максимальна.
Таблиця 2
Вплив температури вирощування на
ріст молочно-кислих бактерій
|
Температура, °G |
Кількість клітин,106
кл/ мл |
|||
|
М±m |
% від max |
|||
|
контроль |
дослід |
контроль |
дослід |
|
|
32 |
203 ±35,5 |
250±30,3 |
40,4 |
48,3 |
|
37 |
495 ±7,1 |
500±6,8 |
99 |
100 |
|
40 |
461±18,4 |
480±17,5 |
93,3 |
95,3 |
|
45 |
161±18‚4 |
180±17,7 |
32,5 |
35,3 |
|
50 |
19±1‚2 |
25±1,0 |
3,8 |
4,4 |
При статистичній обробці було встановлено, що найкращий ріст та
розвиток молочно-кислих бактерій
проходить при температурі 37°-40°С.
( Табл.2 ).
Таким
чином провівши дослідження при різних температурних режимах і рН середовища
найкращим з них є те середовище що має рН-7, а інкубація посівного матеріалу
проходить при 37°С.
Після проведених
досліджень нами запропоновано біотехнологію удосконалення отримання молочно-кислих
бактерій з наступним їх використанням в агропромисловому комплексі.
Запропоноване поживне середовище просте в приготуванні, не шкідливе для
зовнішнього середовища і може використовуватися в мікробіологічних,
науково-дослідних та виробничих лабораторіях.
Висновки
Для удосконалення біотехнології отримання
біомаси молочно-кислих бактерій доцільно використовувати середовище Вінлак з
рН-7 та температурою інкубації посівного середовища -37°С, що забезпечує високу
”урожайність” культур.
Приготовлені з отриманого середовища
бактеріологічні препарати слід використовувати в тваринництві при кишечних захворюваннях та для підвищення
імунітету організму тварин.
Література:
1 . de Vos W.M. Metabolic engineering of sugar catabolism in lactic acid
bacteria. In: Lactic Acid Bacteria: Genetics, Metabolism and Applications //
2. Foo EL,
3. Hosono
A, Lee J, Ametani A, Natsume M, Hirayama M, Adachi T & Kaminogava S. Characterisation
of a water-soluble polysaccharide fraction with immunopotentiating activity
from Bifidobacterium adolescentis
M104-4 // Biosci. Biotech. Biochem.- 1997.- 61.- P. 312-316.
4. Perdigon G., Alvarez S., Rachid M. et al.
Symposium: probiotic baceria for humans: clinical systems for evaluation of
effectiveness. Immune system stimulation by probiotics // J. Dairy Sci.- 1995.-
78, N 12.- P. 1597-1606.
5. Perdigon
G, Medici M, Bibas Bonet de Jorrat ME, Valverde de Buduguer M & Perce de
Ruiz Holgado AA. Immunomodulating effects of lactic acid bacteria on mucosal
and tumoral immunity // Int.J.Immunoter.- 1993.- 9.- P. 29-52.
6. Tohyama
K., Kobayashi Y., Kan T. et al. Effect of lactobacilli on urinary indican
excretion in gnotobiotic rats and man // Microbiol. Immunol.-
1981.- 25, N 1. – P. 101-112.
Свідчення про авторів
|
Ф. І. П авторів |
Назва тезисів |
Адреса отримувача |
Телефон |
Секція |
e-mail |
|
Власенко В. В доктор біологічних наук,
професор. Мартинюк О. М аспірант Соломон А.М аспірант |
Визначення ефективності дослідного
середовища для культивування молочно-кислих бактерій. -//- -//- |
кафедра мікробіології та
технології переробки ВДАУ вул.Привокза- льна 42 м.Вінниця 21001 -//- -//- |
27-23-46 -//- -//- |
Біологі- чні науки -//- -//- |
- - - |