Биологические науки/6. Микробиология

Винников А. И., Воронкова О.С., Джангулашвили Н.М.

Днепропетровский национальный университет, Украина

Диагностика стрептококковых инфекций

Выделение и идентификаци чистой культуры бактерий позволяет изучить морфологические, культуральные, биохимические, антигенные и другие признаки, по совокупности которых определяется видовая и типовая принадлежность возбудителя, то есть производится его идентификация [1].

Результаты микробиологического исследования играют важную роль в выборе и назначении уже на ранних этапах заболевания наиболее эффективных методов лечения, способных предупредить тяжёлые последствия банальных стрептококковых инфекций (ревматизма, острого гломерулонефрита, васкулитов), а в случаях инвазивных стрептококковых инфекций - сохранить жизнь больному. Для этих целей применяют экспресс-методы идентификации стрептококков группы А, позволяющие в течение 15-20 мин диагностировать острую стрептококковую инфекцию без предварительного выделения чистой культуры возбудителя [2].

Вместе с тем выделение стрептококков не всегда свидетельствует об их причастности к патологии в связи с широко распространённым «здоровым» носительством. Истинные инфекции, вызванные стрептококками группы А, всегда вызывают специфический иммунный ответ, что сопровождается значительным повышением титров антител к одному из внеклеточных стрептококковых антигенов - стрептолизину О, дезоксирибонуклеазе В, гиалуронидазе или никотинамид-адениндинуклеотидазе. В последнее время всё большее развитие получают системы иммунодиагностики, основанные на определении антител к компонентам клеточной стенки стрептококков. Наряду с определением антистрептококковых антител выявление циркулирующих антигенов (свободных или в составе иммунных комплексов) имеет большое значение при определении роли стрептококков в формировании иммунопатологических процессов. Основу современных диагностических методов составляют ИФА и применение антисывороток к дискретным антигенам стрептококков группы А [3].

Микроскопия препаратов на данном этапе исследования предусматривает дифференциацию стрептококков от грамотрицательных гемофильных микроорганизмов, рост которых на кровяном агаре сходен с ростом гемолитических стрептококков. В препаратах, приготовленных из колоний с плотных питательных сред, стрептококки располагаются парами, короткими цепочками, иногда образуют скопления, напоминающие грозди стафилококков [2]. Морфологические свойства стрептококков, особенно в первых генерациях, характеризуются выраженным полиморфизмом. Наряду с шарообразными формами в мазках содержатся вытянутые в длину грубые кокки разной величины, даже в пределах одной цепочки. Пневмококки представляют собой ланцетовидные диплококки с заостренными наружными концами, каждая пара кокков или несколько пар заключены в капсулу, образуя цепочки [2].

Соответственно длинны цепочек различают характер роста в жидкой питательной стеде:

а) придонно-пристеночный рост с образованием мелкокрошковатого осадка с сохранением полной прозрачности среды. Зернистый рост характерен для видов и штаммов стрептококка, образующих длинные цепочки (S. pyogenes);

б) придонный рост в виде пушистого рыхлого осадка, с сохранением полной прозрачности или равномерным более или менее интенсивным помутнением надосадочного слоя бульона (S. pneumoniae) [3]. С уменьшением длины цепочек возрастает наклонность к диффузному росту (S. agalactiae, отдельные штаммы вирулентных S. pyogenes, S. faecalis, S. faecium);

в) диффузный рост с интенсивным помутнением бульона и образованием небольшого гомогенного осадка (S. faecalis, S. faecium, отдельные штаммы S. agalactiae, единичные штаммы S. pyogenes) [4].

Бактериологическое исследование. Исследуемый материал засевают на кровяной агар в чашку Петри. После инкубации при 37°С в течение 24 ч изучают характер колоний и наличие вокруг них зон гемолиза. Из части материала, взятого из колоний, готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. Для получения чистой культуры 2—3 подозрительные колонии пересевают в пробирки со скошенным кровяным агаром и сахарным бульоном [4].

На кровяном агаре Str. pyogenes образуют мелкие, величиной с булавочную головку, мутноватые круглые колонии. В бульоне стрептококк в отличие от стафилококка дает придонно-пристеночный рост в виде хлопьев или зерен, оставляя всю среду прозрачной [4]. По характеру гемолиза на кровяном агаре стрептококки делят на три группы: негемолитические; α-гемолитические, или зеленящие, образующие зеленоватую зону частичного гемолиза; β-гемолитические, образующие вокруг колонии полностью прозрачную зону гемолиза [4].

Литература:

1. Покровский В.И., Поздеев О.К. Медицинская микробиология. Москва: ГЭОТАР Медицина, 2001 – 765с.

2. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. Под редакцией Л.Б. Борисова – СПб: Питер, 1996 – 376с.

3. Дж. Х. Йоргенсен, М. А. Пфаллер, пер. с англ. Микробиологический справочник для клиницистов. – М.: «Мир», 2006 - 243 с.

4. Коротяев А. И., Бабичев С. А. Медицинская микробиология. М.: Медицина, 2008 – 767с.