Медицина/5.Педиатрия

 

Блохин Б.М., Сёмин Е.В., Каграманова К.Г.

Российский национальный исследовательский медицинский университет
имени Н. И. Пирогова, Россия

Особенности HLA-генотипа у детей и подростков Московского региона страдающих «дермато-респираторным синдромом»

 

Цель исследования

 

            Целью исследования было проанализировать с помощью олигонуклеотидных зондов и аллель-специфических праймеров (PCR-SSO и PCR-SSP) полиморфизм системы HLA у детей и подростков кавказоидов московского региона с персистирующим течением «дермато-респираторного синдрома» («ДРС») и оценить вклад различных групп аллелей (специфичностей) HLA при формировании данной патологии.

 

Материалы и методы

 

            В исследование было включено 30 детей и подростков в возрасте от 9 до 18 лет (средний возраст 13,1 ± 0,7 лет) одновременно имевших клинические проявления со стороны органов дыхания и кожных покровов (атопическая бронхиальная астма и/или аллергический ринит (риноконъюнктивит) и атопический дерматит), которые были отнесены к группе «дермато-респираторного синдрома» после подписания родителями пациента или пациентом информированного согласия на участие в исследовании. Контрольная группа была представлена 1700 условно здоровых новорожденных детей (европеоидов (кавказоидов)), образцы пуповинной крови которых были внесены в реестр неродственных доноров в городе Москве за период с 2004 по 2009 годы (данные HLA-типирования предоставлены Л.Л. Лебедевой- заведующей «Лаборатории HLA-типирования» Государственного учреждения здравоохранения «Банк стволовых клеток Департамента здравоохранения города Москвы»). Диагноз аллергического ринита основывался на диагностических критериях ARIA, 2010 [1]. Диагноз атопической бронхиальной астмы основывался на диагностических критериях GINA, 2006 [2]. Диагноз атопического дерматита был основан на общепринятых диагностических критериях, сформулированных J. Hanifin и G. Rajka [3].

            Пациентам было проведено общеклиническое и инструментальное обследование, кожно-скарификационное тестирование с неинфекционными атопическими аллергенами, исследование общего сывороточного иммуноглобулина Е и аллергенспецифических IgE, HLA-генотипирование методом полимеразной цепной реакции с помощью олигонуклеотидных зондов и аллель-специфических праймеров. При необходимости осуществлялись консультации врачей-специалистов (врача-оториноларинголога, врача-офтальмолога, врача-дерматолога и врача-пульмонолога).

            Сравнение группы детей с «дермато-респираторным синдромом» и контрольной группы производили c использованием методик Стентона Гланца (1999) [4]. Для проверки значимости связи между двумя категоризованными переменными, вычисленными в результате прямого подсчёта, использовался точный двусторонний критерий Фишера (p=∑pi) с вероятностью ошибки p< 0,05. Для статистических вычислений применяли пакет программ для персонального компьютера «Microsoft Office Excel» и «Statistica for Windows», release 6.0. Для выявления риска возникновения «ДРС» вычисляли относительный риск возникновения заболевания- RR (relative risk). Относительный риск рассчитывался по формуле B. Woolf [5]: RR=, где A- число больных носителей определённой специфичности, B- число здоровых носителей определённой специфичности, C- число больных, не имеющих определённой специфичности, D- число здоровых, не имеющих определённой специфичности. При наличии контрольной группы условно здоровых людей относительный риск возникновения заболевания определяют так же через однофакторное отношение шансов- OR (odds ratio): OR= . Величина OR, равная 1 означает, что исследуемый исход равновероятен в обеих группах. При OR<1 наступление заболевания менее вероятно для пациентов с исследуемой специфичностью. При OR>1 наступление заболевания более вероятно для пациентов с исследуемой специфичностью. Доверительные интервалы для показателей относительного риска развития заболевания и однофакторного отношения шансов не должны проходить через 1. Иначе значение риска учитывать нельзя и данные специфичности не могут рассматриваться в качестве маркёров, увеличивающих или снижающих риск развития «ДРС».

 

Результаты исследования и их обсуждение

 

            Для изучения генетической предрасположенности к «дермато-респираторному синдрому» был проведён сравнительный анализ распределения HLA-специфичностей в генотипе детей и подростков с «ДРС» и контрольной группы. В группе пациентов с «ДРС» достоверно чаще встречались HLA-специфичности: HLA-В*38 (13,33% (f=0,1333) (f- частота встречаемости специфичностей (в долях)) в группе с «ДРС», против 4,36% (f=0,0436) в контрольной группе, р=0,0049 (р- точный двусторонний критерий Фишера)), HLA-В*40 (13,33% (f=0,1333) в группе с «ДРС», против 4,63% (f=0,0463) в контрольной группе, р=0,0071), HLA-C*12 (в группе с «ДРС» выявлялась у 23,33% (f=0,2333) пациентов, тогда как в контрольной группе- у 13,44% (f=0,1344), р=0,0353), HLA-DRB1*09 (у пациентов с «ДРС» встречалась в 6,67 % (f=0,0667) случаев, тогда как в контрольной группе- в 1,46 % (f=0,0146) случаев, р=0,0133) и HLA-DRB1*11 (в группе с «ДРС» встречалась у 23,33 % (f=0,2333) пациентов, в то время как в контрольной группе у 13,05 % (f=0,1305), p=0,0317).

            В группе пациентов с «ДРС» HLA-специфичность HLA-A*24 не встречалась, в то время как в контрольной группе она встречалась в 9,77% (f=0,0977), р=0,0034.

            Среди вычисленных показателей относительного риска и отношения шансов, высокие и достоверные значения в группе детей с «ДРС» были отмечены для следующих специфичностей: HLA-В*38 (RR=3,688, CI-2,079-6,539; OR=3,840, CI-1,679-8,784 (CI- 95%-ный доверительный интервал для истинного относительного риска (RRist) и истинного однофакторного отношения шансов (ORist)), HLA-В*40 (RR=3,457, CI-1,884-6,342; OR=3,588, CI-1,570-8,199), HLA-DRB1*09 (RR=4,794, CI-2,626-8,751; OR=5,124, CI-1,718-15,282) и HLA-DRB1*11 (RR=2,507, CI-1,189-5,289; OR=2,559, CI -1,238-5,291).

            В группе пациентов с «ДРС» отрицательных ассоциаций с HLA-специфичностями, то есть, так называемых, протективных аллелей снижающих риск развития «ДРС», выявлено не было.

 

Выводы и практические рекомендации

 

1.                      В группе пациентов с «ДРС» достоверно чаще встречались HLA-специфичности: HLA-В*38, HLA-В*40, HLA-C*12, HLA-DRB1*09 и HLA-DRB1*11;

2.                      В группе пациентов с «ДРС» HLA-специфичность HLA-A*24 не встречалась в отличии от контрольной группы (р=0,0034);

3.                      Генетическими маркёрами у детей и подростков, увеличивающими риск развития «дермато-респираторного синдрома», являются специфичности: HLA-В*38 (RR=3,688; OR=3,840), HLA-В*40 (RR=3,457; OR=3,588), HLA-DRB1*09 (RR=4,794; OR=5,124) и HLA-DRB1*11 (RR=2,507; OR=2,559);

4.                      В группе пациентов с «дермато-респираторным синдромом» отрицательных ассоциаций с HLA-специфичностями, то есть, так называемых, протективных аллелей снижающих риск развития «ДРС», выявлено не было;

5.                      Определение у новорожденных и детей раннего возраста, особенно, у детей из групп риска по развитию атопических заболеваний, специфических маркёров системы HLA рекомендуется  учитывать как фактор риска развития «ДРС» и для генетического прогнозирования в семьях больных атопическими заболеваниями.

 

Литература

 

1.                                             «Allergic rhinitis and its impact on asthma (ARIA). 2010 revision. Geneva: World Health Organization (WHO)». Guidelines. // J. Allergy Clin. Immunol., 2010, v. 9/8/2010, p. 21;

2.                                             «Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы». // Под ред. Чучалина А.Г. Москва, Издательский дом «Атмосфера», 2007, с. 8, 75-77;

3.                                             Hanifin J.M., Rajka G. «Diagnostic features of atopic dermatitis». // Acta. Dermatol. Venereol. (Stookh), 1980, suppl. 92, p. 44-47;

4.                                             Гланц С. «Медико-биологическая статистика». // М.: Практика, 1999, с. 122-220;

5.                                             Певницкий Л.А. «Статистическая оценка ассоциаций HLA-антигенов с заболеваниями» // Вестник АМН СССР, 1988, №7. с. 48-51.