ИЗМЕНЕНИЕ БЕЛКОВЫХ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ В КЛЕТКАХ

ОКОНЧАТЕЛЬНЫХ ПОЧЕК КРЫС ПОД ВЛИЯНИЕМ ЭНАЛАПРИЛА ОБУСЛОВЛИВАЮТ МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ НАРУШЕНИЯ

ПРЕНАТАЛЬНОГО ОРГАНОГЕНЕЗА ПОЧЕК

Акиншевич И.Ю., Шаповалова Е.Ю.

Кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии (зав.- проф. Е.Ю. Шаповалова) ГУ «Крымский государственный медицинский университет имени С.И. Георгиевского», г. Симферополь, Украина.

Артериальная гипертензия во время беременности остается главной причиной материнской, внутриутробной и неонатальной заболеваемости и смертности (В.Н. Романец, 2001). По данным ВОЗ частота осложнений составляет 25-40%. Публикации последних лет о новых подходах к диагностике и лечению преэклампсии беременных, а также внедрение в практику новых групп лекарственных препаратов дают возможность стабилизировать состояние женщины при развитии заболевания (И.И. Иванов, 2001). Однако, фамакотерапия в акушерстве имеет свои особенности. Поскольку триада мать-плацента-плод является единым фармакокинетическим и фармакодинамическим комплексом, влияние лекарственных препаратов на плод, при назначении их беременным, нельзя не учитывать. Оно имеет, в основном, негативный характер, поэтому стало основной проблемой фармакотерапии при беременности. В связи с возможными серьезными последствиями эта проблема приобретает не только медицинское, но и социальное значение. Влияние гипотензивных препаратов на развитие почек изучено крайне скудно, а сведения об изменениях синтеза белка в клетках и связанных с ним морфологических сдвигах при введении беременным самкам блокаторов антиотензинпревращающего фермента (АПФ) эналаприла в органогенезе окончательных почек отсутствуют вообще.

Целью работы явилось определение морфологических нарушений, обусловленных изменением содержания РНК в цитоплазме эпителиальных клеток и клеток мезенхимы развивающихся окончательных почек крыс под действием эналаприла.

В исследовании использованы эмбрионы и плоды самок белых беспородных крыс, полученных в семи сериях эксперимента в возрасте с 12-х по 22-е сутки нормальной беременности и при беременности с применением терапевтических, субтоксических и токсических доз эналаприла. Из полученного материала были изготовлены cерийные парафиновые срезы толщиной 5 мкм. Обзорные препараты окрашивались гематоксилином и эозином. Содержание РНК в цитоплазме клеток определяли после окраски по методике Эйнарсона с применением галлоцианин-хромовых квасцов. Интенсивность окраски оценивалась с помощью компьютерной программы Aperio Image Scopе 2008.

При введении терапевтической дозы эналаприла беременным самкам крыс на 17-е сутки беременности в окончательной почке присутствуют только нефроны первых двух генераций, находящихся на разных стадиях сегментации. Третьей генерации нефронов не наблюдается. Почечные тельца нефронов 1-й генерации полностью не сформировались. Канальцев нет. На 18-е сутки обнаруживается третья генерация нефронов. Четвертой генерации нефронов, которая должна присутствовать в этом возрасте, нет. Почечные тельца по-прежнему недоразвиты. Нефроны второй и третьей генерации находятся только на стадии S-образных структур. Развитие канальцев недостаточное. Четвертая генерация нефронов появляется только на 20-е сутки в виде S-образных структур. В этом возрасте канальцы нефронов первых двух генераций расширены. Имеются явления отека интерстиция между закладками нефронов. На 22-е сутки в метанефросе присутствует необычно широкая метанефрогенная бластема, где продолжается процесс сегментации нефронов, который должен быть в этом возрасте закончен. Канальцы нефронов в корковом веществе сужены и маленьких размеров, а в мозговом веществе расширены. Почечные тельца нефронов первых генераций большие с расширенным мочевым пространством. В некоторых отсутствуют сосудистые клубочки. Процесс дегенерации нефронов первых генераций не завершен.

Наиболее агрессивна субтоксическая доза эналаприла. На 17-е сутки обнаруживаются только нефроны первой генерации и их количество уменьшено по сравнению с контрольной экспериментальной группой. Почечные тельца этих нефронов деформированы, мочевое пространство отсутствует или слабо выражено. Канальцы не сформированы. Метанефрогенная бластема сильно сужена. На 17-е сутки вместо четырех генераций нефронов присутствует всего две. Почечные тельца нефронов первой генерации деформированы. Канальцы сужены. Почечные тельца нефронов второй генерации находятся на стадии шаровидного сгущения клеток метанефрогенной бластемы. В интерстиции – явления отека. К 20-м суткам образуются три генерации нефронов. Их количество значительно меньше, чем в контрольной группе, и они деформированы. Канальцевая система нефронов развита слабо. Местами канальцы отсутствуют. Метанефрогенная бластема резко сужена и в некоторых местах на срезах не просматривается. Наблюдается переполнение кровью сосудов нечетко разграниченного коркового и мозгового вещества. Имеются кровоизлияния в эмбриональную соединительную ткань почек и в канальцы нефронов. На 22-е сутки недоразвитие почек усугубляется. Нефронов мало и нарушено их послойное расположение. Встречаются нефроны маленьких размеров. Канальцы недоразвиты, их просвет сужен. Стенки некоторых канальцев разрушены. Околомозговые нефроны имеют очень большие почечные тельца с резко расширенным мочевым пространством. Наблюдается стаз крови в сосудах и кровоизлияния в канальцы и интерстиций метанефроса.

Токсическая доза эналаприла менее токсична для развития почек, чем субтоксическая доза, и ее влияние напоминает действие терапевтической дозы препарата, особенно на 17-е сутки развития. На 18-е сутки в метанефросе присутствуют достаточно развитые две генерации нефронов. Третья генерция обозначена сгущением клеток метанефрогенной бластемы. 4-й генерации, имеющейся в контрольной групп, нет. Первая генерация нефронов имеет развитые почечные тельца и канальцы. Закладка нефронов второй генерации находится на S-образной стадии без зачатков канальцев. На 20-е сутки обнаруживаются три заметные генерации нефронов и четвертая в виде шарообразного сгущения метанефрогенной бластемы. Общее количество нефронов меньше, чем в контрольной группе. Канальцы нефронов имеют сужение просвета и деформацию. Выражен отек интерстиция, особенно вокруг канальцев. На 22-е сутки нефронов в метанефросе заметно меньше, чем в контрольной группе. Околомозговые нефроны единичны и очень больших размеров. Метанефрогенная бластема узкая и с признаками сегментации нефронов. Канальцы в корковом веществе сужены, а в мозговом веществе расширены и деформированы. Ярко выражен отек коркового и мозгового вещества.

Изменения содержания РНК в метанефросе под влиянием терапевтической дозы эналаприла обнаруживаются уже на 17-е сутки эмбриогенеза. Количество его в клетках эпителия увеличивается по сравнению с нормой на 12%. В клетках мезенхимы изменения менее выражены и увеличение количества РНК достигает всего 6%. Наиболее выраженные изменения в развивающемся метанефросе крыс появляются на 22-й день развития, когда происходит уменьшение содержания РНК в клетках эпителия на 91%, эмбриональной соединительной ткани – на 8,0%. Изменения в содержании РНК в цитоплазме клеток окончательных почек под влиянием субтоксической дозы эналаприла имеют более выраженный характер. Заметные сдвиги здесь в сторону угнетения синтеза белка начинаются с 17-го дня гестации и к 22-м суткам достигают рекордного для этого препарата снижения содержания РНК в клетках эпителия на 96,75% и в клетках эмбриональной соединительной ткани на 79,09%. Токсическая доза эналаприла не оказывает столь яркого действия на количество РНК в клетках эпителия и эмбриональной соединительной ткани , хотя к 22-м суткам снижение содержания РНК в клетках эпителия достигает 90%, а в клетках эмбриональной соединительной ткани – 79%. Все дозы эналаприла оказывают большее влияние на содержание РНК в цитоплазме клеток эпителия по сравнению с таковым в клетках мезенхимных закладок.

Выводы. 1. Прием эналаприла беременными самками крыс изменяет органогенез почек у эмбрионов и ведет к их резкому недоразвитию, с уменьшением количества нефронов и преимущественным поражением канальцевой системы.

2. В процессе развития эмбрионов в цитоплазме клеток эпителиальных и мезенхимных закладок окончательных почек крыс контрольной группы происходит постепенное снижение содержания РНК.

3. У эмбрионов крыс, матери которых получали исследуемые дозы эналаприла, наблюдаются статистически достоверные изменения содержания РНК в цитоплазме клеток метанефроса. Наименее существенны они в окончательных почках после приема эналаприла в терапевтической дозе, и наиболее существенны – после применения субтоксической дозы.

4. Все дозы эналаприла оказывают большее влияние на содержание РНК в цитоплазме клеток эпителия по сравнению с таковым в клетках мезенхимных закладок.