К.б.н. Мусайнова А.К.

Семипалатинский медицинский университет, Казахстан

Состояние периферических органов иммуногенеза в ближайшем и отделенном периодах после действия различной дозы гамма-излучения.

 

 

Лимфоидые клетки, с которыми связаны все иммунные механизмы организма появляются, созревают и функционируют в определенных органах иммунной системы. Лимфоидные органы разделяют на два типа: первичные (центральные) и вторичные (периферические). В центральных органах созревание лимфоцитов происходит без существенного влияния антигенов, в то время как развитие периферических, напротив, непосредственно зависит от антигенного воздействия. Лишь при контакте с антигеном в них начинаются процессы пролиферации и дифференцировки. В центральных органах – костный мозг, вилочковая железа и сумка Фабрициуса происходит дифференцировка определенных популяций лимфоцитов: вилочковая железа представляет собой тимусзависимые, или Т-лимфоциты, а в сумке Фабрициуса образуются В-лимфоциты. После рождения костный мозг становится основным источником стволовых клеток.

Периферическими лимфоидными органами следует считать селезенку, лимфатические узлы, миндалины, а также ассоциированную с кишечником и бронхами лимфоидную ткань. Периферические органы иммунной системы заселяются Т- и В-лимфоцитами из центральных органов, при этом каждая популяция лимфоцитов мигрирует в определенные области периферических органов, которые называются тимусзависимыми и тимуснезависимыми зонами.

Анализ данных литературы показывает, что при ионизирующем облучении происходят тонкие и сложные механизмы нарушений в лимфоидных органах, требующие дальнейшего детального изучения для прогнозирования и коррекции иммунологических и биохимических сдвигов.

Целью работы явилось изучение состояния селезенки и лимфатических узлов тонкого кишечника в ближайшем и отдаленном периодах после сублетального, фракционированного и действия малой дозы гамма-излучения

Материал и методы исследования

Для решения поставленной цели нами были выполнены 7 серий опытов на 135 белых беспородных половозрелых крысах. 1 серия – интактные (n=15), 2-я серия (n=20) и 3-я серия (n=20) облученные сублетальной дозой гамма-излучения 6 Гр. через 1 (ближайший период, n=20) и 3 месяца (отдаленный период, n=20)  соответственно, 4 и 5 серий – после фракционированного гамма-обучения в ближайшем (через 1 месяц, n=20) и отдаленном (через 3 месяца, n=20) периодах, в 6 и 7 серии животных подвергали воздействию малой дозы гамма-излучения  0,15 Гр. по 20 животных в каждой серии.

2 и 3 серии животных подвергли общему облучению на радиотерапевтической установке «Луч-1» мощностью 125 Р в час гамма-лучами 60Со в дозе 6 Гр. 4 - 5 серии подверглись общему фракционированному воздействию гамма-лучами по 1,5 Гр еженедельно в течение 4 недель (суммарная доза составила 6Гр.).  В 6 и 7 серии  проводили общее  гамма-облучение в дозе 0,15 Гр. Мощность дозы - 74,5 Р в мин, на поверхности 700 Р, РИП-60 см, размер поля – 19х19 см. Во время облучения животные находились в специально сконструированной камере из органического стекла, с изолированными ячейками для отдельных животных. Время экспозиции для получения дозы 6 Гр составило 9 мин 24 сек, дозы 1,5 Гр – 3 мин 28 сек, дозы 0,15 Гр – 39 сек, в последнем случае доза на поверхности  - 23 Р.

Во время облучения животные находились в специально сконструированной камере из органического стекла, с изолированными ячейками для отдельных животных.

У всех животных до и после ионизирующего облучения в селезенке и лимфатических узлах тонкого кишечника изучали массу, лимфоидный индекс и количество лимфоидных клеток. Клеточные суспензии готовили из селезенки, и лимфатических узлов тонкого кишечника подопытных животных. Осуществляли подсчет кариоцитов и определяли их жизнеспособность. Количество лимфоидных клеток в селезенке и лимфатических узлах тонкого кишечника определяли по методике О.И.Белоусовой и М.И.Федотовой (1983). Определение лимфоидного индекса селезенки  выполнялось по методике Е. Д.Гольдберга и соавт. (1972), а в лимфатических узлах тонкого кишечника - по методу Б.А. Жетписбаева (1995).

Полученные цифровые данные обрабатывались общепринятыми методами вариационной статистики по методике Е.В. Монцевичюте-Эрингене (1966).

Результаты и обсуждение

Из таблицы 1 видно, что в ближайшем периоде после сублетального гамма-облучения в дозе 6 Гр в лимфатических узлах тонкого кишечника фиксируются существенные изменения. Отмечено достоверное снижение массы, числа лимфоидных клеток и лимфоидного индекса на 28%, 27% и 28% соответственно (P<0,05).

В отдаленном периоде после сублетального гамма-облучения в лимфатических узлах тонкого кишечника масса возрастала до контрольного уровня, практически оставались без изменения уровень лимфоидных клеток и лимфоидный индекс; их уровни не достигали контрольных величин.

Приведенный фактический материал показывает, что в отдаленном периоде после сублетального гамма-излучения в лимфатических узлах тонкого кишечника снижены количества лимфоидных клеток и лимфоидный индекс.

В ближайшем периоде после сублетального гамма-излучения несмотря на снижение массы селезенки на 31,5%  и лимфоидного индекса на 24%, отмечалось достоверное повышение числа лимфоидных клеток на 44%. 

 

Таблица 1 - Состояние  лимфатических узлов тонкого кишечника и селезенки при гамма-облучении в дозе 6 Гр в отдаленном периоде

 

Объекты исследования

 

Показа-

тели

Серии опытов

 

1.интактные

(n=15)

2.облученные +

1 месяц (n=20)

3.облученные +

3 месяца (n=20)

 

Лимфоузлы тонкого кишечника

1

 0,15±0,021

0,11±0,010*

0,13±0,020

 

2

 0,72±0,031

0,58±0,025*

0,50±0,0130*

 

3

 0,08± 0,002

0,06±0,004**

  0,059±0,003**

 

 

Селезенка

1

0,70±0,074

0,48±0,026*

0,55±0,021*0

 

2

2,5±0,39

3,6±0,24*

3,0±0,210

 

3

0,38±0,024

0,29±0,031*

0,33±0,018

 

Примечание:  * - достоверно к 1 группе, (P<0,05), ** - достоверно к 1 группе, (P<0,001), 0 – достоверно ко 2 группе (P<0,05); 1 - масса органа в мг, 2- лимфоидные клетки (106), 3 - лимфоидный  индекс,  n – количество опытов

 0,38±0,024

0,29±0,031*

0,33±0,018

 

В отдаленном периоде после сублетального гамма-облучения в селезенке повышается количество лимфоидных клеток и уровень лимфоидного индекса до контрольных величин. В то же время масса селезенки возрастает, но в отличие от других изучаемых показателей, не достигает контрольного уровня. Ее значения достоверно ниже контрольного уровня.

По приведенному материалу можно сделать заключение, что в отдаленном периоде после сублетального действия гамма-излучения в селезенке происходит нормализация числа лимфоидных клеток, лимфоидного индекса и снижение ее массы. В лимфатических узлах тонкого кишечника снижены количества лимфоидных клеток и лимфоидный индекс.

Большинство лимфоцитов периферических органов иммунной системы не закрепляется в них постоянно, а через некоторое время покидает их в основном после контакта с антигеном, включаясь в рециркуляцию лимфоцитов. Практически все лимфоциты достигают всех систем органов, так, что ни один антиген не остается незамеченным [204].

Отсюда возникает вопрос о роли не антигенного воздействия облучения на лимфоидные органы, в частности, о функциональном состоянии лимфоидных органов у лиц, постоянно или временно проживающих в регионах с повышенным радиационном фоном. В литературе имеется ограниченное число данных по исследованию лимфоидных органов при фракционированном облучении гамма-лучами [22].

Исходя из этого, вытекает необходимость изучения влияния фракционированного воздействия гамма-излучения на функциональное состояние центральных и периферических лимфоидных органов иммунной системы. В первую очередь, в эксперименте необходимо выявить патогенетические механизмы фракционированного воздействия радиации и обосновать теоретические подходы в разработке системы адекватных профилактических и реабилитационных мероприятий, направленных на снижение неблагоприятных воздействий, и, способствующих облегчению процесса адаптации организма.

При анализе иммунологических показателей по их среднестатистическим значениям [106] у всего населения обследованных регионов были выявлены выраженные изменения иммунологических показателей в сравнении с контрольной группой. Особое внимание привлекает функциональная активность центральных и периферических лимфоидных органов у жителей при фракционированном воздействии радиационных факторов.

В этой связи нами изучено состояние лимфоидных органов при фракционированном воздействии гамма-излучения в отдаленном периоде. Результаты исследования представлены в таблице.

В эксперименте были использованы 40 белых половозрелых беспородных крыс обоего пола. Животных подвергали в течение 3 недель облучению гамма лучами Со60, суммарная доза облучения составила 6 Гр. Контрольными для данной группы служили интактные животные (n=10).

Данные лимфоидных органов в ближайшем и отдаленном периодах при фракционированном гамма излучении представлены в таблице 2. В ближайшем периоде после фракционированного гамма-облучения в лимфатических узлах тонкого кишечника достоверно снижаются все изучаемые органы – масса на 34%, количество лимфоидных клеток –на 16% и лимфоидный индекс на 37,5% (P<0,05).

В отдаленном периоде после фракционированного гамма-облучения в лимфатических узлах тонкого кишечника происходит нормализация массы, достоверно сниженными остаются количество лимфоидных клеток и лимфоидный индекс

Таблица 11 - Состояние селезенки и лимфоузлов тонкого кишечника при фракционированном гамма облучении в отдаленном периоде

Оpганы

Показа-

тели

Исследуемые группы

1 - интактные

(n=10)

2 - облученные

+30 дней (n=20)

3 - облученные

+90 дней (n=20)

Лимфоузлы

тонкого

кишечника

1

0,15±0,02

0,10±0,015*

0,10±0,030

2

0,72±0,031

0,61±0,025*

0,61±0,030*

3

0,08± 0,002

0,05±0,006**

0,06±0,006**

 

Селезенка

1

0,70±0,074

0,80±0,090

0,8±0,090

2

2,5±0,39

1,3±0,08*

2,6±0,09

3

0,38±0,024

0,44±0,025

0,36±0,016

Примечание: * - достоверно к 1 группе, (P<0,05), **- достоверность (Р<0,001);

 1 –масса органа в мг, 2- лимфоидные клетки (106), 3 - лимфоидный индекс

 

Таким образом, в лимфатических узлах тонкого кишечника при фракционированном гамма- облучении происходит снижение массы, количества лимфоидных клеток и лимфоидный индекс.

В селезенке в ближайшем периоде после фракционированного гамма-облучения масса и лимфоидный индекс существенного изменения не претерпевают, на фоне достоверного снижения на 48% количества лимфоидных клеток.

В отдаленном периоде после фракционированного гамма-облучения в селезенке отмечается нормализация числа лимфоидных клеток, массы и лимфоидного индекса.

Таким образом, в отдаленном периоде после фракционированного гамма-облучения отмечается снижение количества лимфоидных клеток и лимфоидного индекса в лимфатический узлах тонкого кишечника и рнормализация их в селезенке.

В таблице 3 представлена динамика изменений состояния лимфоидных органов при воздействии малой дозы гамма-излучения в ближайшем и отдаленном периодах. Анализ материала показывает, что при действии малой дозы гамма-излучения в ближайшем периоде в селезенке происходят следующие изменения: снижаются достоверно количество лимфоидных клеток на 48% и лимфоидный индекс на 24%, масса селезенки не изменяется. В лимфатических узлах тонкого кишечника в этот период имело тенденцию к снижению масса органа, снижалось значимо лимфоидный индекс на 46%, и  повышалось число лимфоидных клеток на 80%.

Анализ приведенного материала показывает, что в ближайшем периоде после воздействия малой дозы гамма-излучения происходит миграция лимфоидных клеток из селезенки в лимфатические узлы тонкого кишечника.

                                               .

Таблица 3 - Динамика изменений состояния периферических лимфоидных органов при воздействии малой дозы гамма-излучения в ближайшем и отдаленном периодах.

ОРГАНЫ

Изучаемые показатели (ближайший период)

Вес (мг)

Лимфоидные клетки (106)

Лимфоидный индекс

Селезенка

    1. 0,7+0,074

            2. 0,7+0,030

2,5+0,39

1,3+0,1*

4,3+0,34

3,3+0,06*

Лимфатические узлы

            1. 0,15+0,021

            2. 0,10+0,030

0,72+0,031

1,30+0,10**

0,93+0,020

0,50+0,060**

Отдаленный период

Селезенка

0,8+0,01

2,2+0,1

3,4+0,2*

Л/узлы

            0,2+0,06

0,4+0,06**

0,50+0,060**

Костный мозг

1.

0,6+0,02**

-

Примечание: 1- контрольная, 2 – опытная.

* - достоверно к контрольным данным (P<0,05), ** - (P<0,001).

 

В отдаленном периоде после воздействия малой дозы гамма-излучения в селезенке отмечается тенденция повышения массы органа, снижения количества лимфоидных клеток и достоверное снижение лимфоидного индекса в 1,26 раза. В лимфоидных органах тонкого кишечника масса органа практически не меняется, но статистически достоверно снижены количество лимфоидных клеток в 1,8 раза и лимфоидный индекс в 1,9 раза.

Таким образом, в ближайшем периоде после воздействия малой дозы гамма-излучения происходит перераспределение лимфоидных клеток из селезенки в лимфатические узлы тонкого кишечника. В отдаленном периоде после воздействия малой дозы гамма-излучения отмечается  перераспределение лимфоидных клеток в селезенку из лимфатических узлов тонкого кишечника. 

 

 

Жетписбаев Б., Серимханова Б.Т., Узбекова С., Жетписбаев Г., Калибекова А., Ильдербаев Функциональное состояние лимфоидных органов иммунной системы в отдаленном периоде после общего сублетального гамма-облучения в эксперименте.// Астана медициналык журнал, 2005, №3, С.72-75.

2. Мусайнова А., Бегалинова С., Нурмухамбетов Ж., Ильдербаев О. Лимфоидные органы иммунной системы при иммунодефицитных состояниях// Материалы Международной научно-практической Конференции «Актуальные проблемы экологии и пути их реше-ний», 26-27 октября 2006, Семей-2006, С.325-331.

  3. Мусайнова А., Узбекова С., Сабырханов А. Состояние лимфоидных органов иммунной системы в отда-ленном периоде после воздей-ствия реаферона и сублеталь-ного гамма-излучения // Материалы YI съезда физиологов Казахстана 2-3 июля 2007, Караганда, 2007, С.37-75.

. 4. Ильдербаев О., Сайдахметова А.,Уразалина Н., Мусайнова А.Влияние радиации и надземной части Serratula coronata на центральные и периферические лимфоидные органы иммунной системы// Материалы II Между-народной научно-прак-тической конференции

«Медико-социальная реабилитация  населе-ния экологически н благоприятных регио-нов, посвященная 55-летию Семипалатинской медицинской академии, 29 августа 2008, Семей, 2008,  С.80-80.

5. Жагипарова Ж., Калдыбаева М., Ильдербаев О., Жетписбаева Х. Количественные изменения лимфоидных клеток в иммунокомпетентных органах при действии радиации и фитопрепарата Digitalis lanata L. в экс-перименте// Материалы II Между-народной научно-прак-тической конференции

«Медико-социальная реабилитация  населе-ния экологически н благоприятных регио-нов, посвященная 55-летию Семипалатин-ской медицинской ака-демии, 29 августа 2008, Семей, 2008,  С.77-77.

6. Жагипарова Ж., Жетписбаев Б.А., Кравцов В.И. Особенности влияния травмы в сочетании с облучением на клеточность костного мозга и лимфоидных органов в эксперименте // Наука и Здравоохранение, 2009, №4, Т.1, С.102-103.

7. Жетписбаев Б.А. Иммунокоррекция нарушений адаптационных механизмов при стрессе на фоне лучевого поражения организма Автореф. дисс. д.м.н., Алматы, 1998. 45 С.

8. Узбекова С.Е. Особенности функционального состояния иммунной системы в отдаленном периоде после различных дозовых нагрузок гамма-облучения. Автореф. дисс. к.м.н., Семей, 2008, 24С.

9. Усенова О.А. Особенности обменных процессов животного организма в отдаленном периоде после острой и фракционированной дозы гамма-облучения. Автореф. к.б.н., Алматы, 2007, 20С.

11. Аргынбекова А.С. Коррекция фитосубстанциями иммунологических и обменных процессов при радиационном поражении организма. Автореф. дисс. д.м.н., Астана, 2009. 43С.

12. Жетписбаев Г.А. Изменение функционального состояния иммунной системы при действии ионизирующего излучения на организм и способы ее коррекции. Автореф. дисс. д.м.н., Алматы, 2006. 36 С.

13. Аргынбекова А.С. Изменение количества лимфоидных клеток в центральных и периферических органах иммунной системы под воздействием общего сублетального гамма-излучения и фитопрепарата Pb//Республиканский научный журнал Хабаршысы», Шымкент, 2008, №2, (39), С.85-87.

14. Серимханова Б.Т., Жетписбаев Б.А., Калибекова А.Д., Жетписбаев Г.А., Ильдербаев О.З., Узбекова С.Е. Функциональное состояние лимфоидных органов иммунной системы в отдаленном периоде после общего сублетального гамма-облучения в эксперименте //Астана медициналык журналы, 2005, №3, С.72-74.