Ж.Б.Тусупова

(Карагандинский Государственный университет имени Е.А. Букетова,

г. Караганда)

ПРИМЕНЕНИЕ МИКРОЯДЕРНОГО АНАЛИЗА ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ХЛОРИДА АЛЮМИНИЯ И ЕГО КОРРЕКЦИЯ ПРЕПАРАТОМ «САЛСОКОЛЛИН»

Известно, что алюминий способен оказывать токсическое воздействие на различные ткани и кровь[1].

В условиях, практической невозможности быстрого и всестороннего улучшения и очищения окружающей среды, перспективной и актуальной представляется разработка специальных методов для повышения связывания и выведения тяжелых металлов, с одной стороны и повышения реактивности организма к вредным воздействиям приспособления его к меняющимся условиям среды обитания, с другой стороны [2].

Можно предположить, что использование протекторных веществ будет обеспечивать уменьшение опасности повреждения внутренней среды организма вредными для здоровья химическими агентами. В связи с этим представляет интерес проведение скрининга ряда природных и синтетических биологически активных соединений, которые могут быть использованы для нейтрализации вредного воздействия тяжелых металлов на организм.

В Республике Казахстан широко распространено в степной части, на солонцеватых местах Северной и Центральной областях страны однолетнее растение Salsola collina Pall. (солянка холмовая), которая является природным источником ряда фармакологических соединений, у которых предполагается наличие высокой биологической активности [3].

Солянка холмовая – растение с обширным ареалом произрастания. В литературе [4, 5] встречаются упоминания об эффективном использовании ее настоев и экстрактов в качестве витаминов и капилляроукрепляющих средств, репаративно – регенераторных, бактерицидных, противовоспалительных, спазмолитических, противовирусных, противоопухолевых, кардиотропных средств. В народной медицине извлечения из солянкой холмовой применяют как эффективное средство для лечения заболеваний печени и холецистита.

Фитохимическое изучение сырья солянки холмовой показало присутствие большого количества химических соединений: полифенольных соединений, незаменимых аминокислот, углеводов, дубильных веществ, микроэлементов. Среди полифенольных соединений основную часть составляют флавоноиды (0,35% по кверцетину): кверцетин (10), рутин (19), трицин (43), изорамнетин– 3–О–β–D– глюкопиранозид. Суммарное содержание флавоноидных соединений в экстракте составляет 1,6%.

Исходя из структуры и данных биологической активности флавоноидов, в частности, кверцетина, логично было предположить наличие цитопротекторных свойств у экстракта солянки холмовой. Изучение антиоксидантных свойств у каждого из составляющих показало, что эффект суммарного экстракта значительно выше, что, видимо, связано с синергическим действием веществ, входящих в экстракт.

В институте фитохимии МОН РК был разработан гепатопротекторный препарат «Салсоколлин» на основе экстракта солянки холмовой (Salsola collina Рall.) [6].

Целью работы явилось изучение информативности анализа микроядер при хроническом воздействии хлорида алюминия и его коррекция препаратом «Салсоколлин».

Материалы и методы

Эксперименты проведены на 30 белых беспородных крысах-самцах, массой 170 - 200 г., которые были разделены на 3 группы. Первая группа (n=10) - интактные животные, вторая группа (n=10) - состояла из животных, которым в течение 3-х месяцев вводили перорально хлорид алюминия в дозе 20 мг/кг, третья группа (n=10) - состояла из животных, получавших в течение 3-х месяцев перорально хлорид алюминия в дозе 20 мг/кг и в течение 1,5 последних месяцев, кроме хлорида алюминия, препарат «Салсоколлин» в дозе 50 мг/кг.

Учет частоты эритроцитов с микроядрами проводили в крови крыс непосредственно перед забоем. Каплю крови помещали на обезжиренное предметное стекло, шлифованным стеклом делали мазок и высушивали на воздухе. Через час препараты фиксировали в абсолютном метаноле и окрашивали гематоксилин-эозином. При анализе подсчитывали количество эритроцитов с микроядрами на 2000 клеток [7].

Результаты и обсуждение

Клетки с микроядрами изучены рядом авторов [8, 9] с последующей рекомендацией метода подсчета микроядер в качестве простого и удобного теста при исследовании мутагенеза.

Микроядерный анализ, проведенный в эритроцитах при хроническом воздействии хлорида алюминия, показал, достоверное увеличение частоты клеток с микроядрами на 241%, т.е. до 0,41±0,017, Р<0,001 по сравнению с контролем 0,12 ± 0,014.

Следовательно, микроядерный анализ в эритроцитах является достаточно чувствительным тестом выявления мутагенного действия хлорида алюминия.

При коррекции препаратом «Салсоколлин» уровень микроядер достоверно снизился на 41%, Р<0,001 до 0,24+0,019 по сравнению с опытной группой 0,41±0,017.

Таким образом, препарат «Салсоколлин» оказывает антитоксическое и антимутагенное действие при интоксикации хлоридом алюминия в хроническуом эксперименте, что предполагает перспективность его использования для профилактики и коррекции последствий токсических поражений.

Литература:

1. Бiохiмiчна адаптацiя тварин до бiотопiв iз пiдвишеним рiвнем алюмiнiю: Тез. [8 Украпнський бiохiмiчний з'пзд, Чернiвцi, 1–3 жовтня, 2002. Ч.2] Руденко С.В.// Укр. бiохiм. ж.– 2002.– 74, № 4, Ч. 1.– С. 16.

2. Мурзахметова М.К., Турмухамбетова В.К., Утегалиева Р.С. и др. Влияние природных и синтезированных биологически активных соединений на состояние клеточных мембран при действии токсикантов // Известия НАН РК. Серия биологическая и медицинская.- 2003.-№6.-С. 76- 85.

3. Кульмагамбетова Э.А., Прибыткова Л.Н., Адекенов С.М. Флавоноиды и аминокислоты Salsola collina Рall.// Переработка лекарственного сырья и производство фитопрепаратов для медицины и сельского хозяйства.- Алматы, 1996.- С. 31 – 33.

4. Зейнулъдина А.С., Назарова А.Ж.., Мурзагулов К.К., Тулеуов Б.И., Сейтембетов Т.С., Сейтембетова А.Ж. Антиоксидантное действие некоторых флавоноидов солянки холмовой в пищевых добавках // Астана медициналық журналы.- 2005.-№4.- С. 150 – 152.

5. Кусаинова Д.Д. Основы фармакодинамики фенольных соединений // Фармация Казахстана. Специальный выпуск, август, 2005, С.33-35.

6. Адекенов С.М., Токпаев А.Х., Кульмагамбетова Э.А. и др. Гепатопротекторное и антиоксидантное средство. Предпатент РК №5696 от 15.01.98 г.

7. Ильинских Н.Н., Новицкий В.В., Ванчугова Н.Н., Ильинских И.Н. Микроядерный анализ и цитогенетическая нестабильность. Томск, 1991.- 272 с.

8. Schoeder T.M. Genetically determined chromosome instability syndromes // Cetogenet. Cell Genetics.-1982.-V.33.-P. 119-132.

9. Stich H.F., Curtis J.R., Parida B.B. Application of the micronucleus test to exfoliated cells of high cancer risk groups: tobacco chewers // Int. J. Cancer.- 1982.-V.30.-P. 553-559.