Изменение характера взаимоотношений между антителами и комплементом при ряде онкологических заболеваний

Биологические науки/9. Биохимия и биофизика

Д.б.н. Князева О.А.

Башкирский государственный медицинский университет, Россия

Изменение характера взаимоотношений между антителами и комплементом при ряде онкологических заболеваний

Одной из причин нарушения противоопухолевой защиты организма может быть изменение характера взаимодействия между системами иммунитета и их составляющими. Поэтому исследование тонких взаимоотношений между двумя ключевыми представителями специфического и неспецифического иммунитета – IgG и C1q, может приблизить к разгадке феномена иммунной резистентности новообразований.

Изучение параметров гуморального иммунитета: IgG, IgA, IgM и общей гемолитической активности комплемента (СН50) в сыворотке крови больных ХЛЛ, ХЛ, НХЛ и РМЖ существенных отличий не выявило (таб.).

Таблица.

Показатели содержания иммуноглобулинов и СН50 в сыворотке крови больных хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ), ходжкинскими (ХЛ) и неходжкинскими лимфомами (НХЛ), раком молочной железы (РМЖ) и здоровых доноров.

№ п/п	Исслед. группы (по n=20)	Иммуноглобулины, г/л			CH50
№ п/п	Исслед. группы (по n=20)	IgG	IgA	IgM	CH50
1	ХЛЛ	7,98±0,92*^#	1,21±0,11*	1,17±0,19	42,7±2,5
2	ХЛ(	10,8±1,89	1,74±0,79	1,40±0,17	44,2±2,3
3	НХЛ	10,7±1,86	1,68±0,33	1,41±0,19	43,8±1,9
4	РМЖ	13,6±1,91*	1,42±0,31	1,24±0,13	46,8±2,4
5	Контроль	12,1±1,62	1,87±0,26	1,48±0,29	47,9±2,8

Примечание: в сравнении с контролем * и РМЖ # – p < 0,05.

Однако при оценке взаимодействия C1q с IgG при ХЛЛ, ХЛ, НХЛ и РМЖ, оказалось, что при данных заболеваниях происходит ослабление взаимодействия IgG с C1q. Так, величина Kd, составляющая для доноров (1,91±0,42)·10^-7М, при неопластических состояниях значительно возрастала и становилась при ХЛЛ – (13,16 ± 3,29)·10^-7М (p < 0,01), ХЛ – (6,68±1,22)·10^-7 М (p < 0,01), НХЛ – (5,76±1,25)·10^-7 М (p < 0,02), РМЖ – (3,88±0,7)·10^-7 М (p < 0,05).

Заметное (примерно на 30%) снижение аффинности МкАТ к антигенным детерминантам, расположенным лишь на Fc-фрагменте IgG, выражающееся в увеличении констант диссоциации комплекса IgG-МкАТ (p < 0,05 – р < 0,002), свидетельствовало о наличии некоего «экрана» в данной области молекулы IgG. При этом изменения аффинности к антигенным детерминантам других областей не наблюдалось.

На основании полученных результатов была предложена гипотеза о стерическом «экранировании» центра связывания C1q с IgG образующимися вследствие повышенной деструкции опухолевых и окружающих опухоль клеток амфифильными метаболитами – лигандами.

Для доказательства этой гипотезы была проведена количественная оценка доли C1q, взаимодействующих с IgG (находящихся в ассоциированном состоянии) из сыворотки крови больных ХЛЛ и здоровых лиц, с помощью реакции связывания комплемента (РСК) и иммуноферментного анализа (ИФА).

В отличие от IgG мономеров, образующих c C1q сильно диссоциирующий комплекс, молекулы IgG, объединенные в кластер, обеспечивают множественность точек прикрепления C1q, благодаря чему комплекс IgG-C1q значительно стабилизируется. Т.к. мономер IgG больше двух центров связывания с C1q иметь не может, то для более наглядного сравнения количества C1q, присоединяющегося к IgG, нужно, чтобы молекулы IgG находились в ассоциированном состоянии, при котором количество этих центров резко возрастает. При взаимодействии IgG в таком состоянии с C1q могут образовываться различные комплексы: IgG-L-C1q_n, IgG-L-C1q_n₊₁, IgG-L-C1q_n₊₂, IgG-L-C1q_n₊₃ и т.д. При отсутствии связывания IgG с лигандом количество C1q в комплексе с IgG будет меньше, и такой комплекс будет выглядеть, например, как IgG-C1q_n_-1. Константы диссоциации этих комплексов будут изменяться под влиянием стохастических факторов, то есть, чем больше лигандов присоединяется к IgG, тем больше диссоциация образовавшегося комплекса. Соответственно, количество C1q в этих комплексах будет уменьшаться следующим образом: IgG-L-C1q_n₊₃ > IgG-L-C1q_n₊₂ > IgG-L-C1q_n₊₁ > IgG-L-C1q_n > IgG-C1q_n_-1.

По РСК с сенсибилизированными рецепторами эритроцитов барана (ЕА) в присутствии IgG можно косвенно судить о количестве C1q, связавшихся с исследуемыми IgG. Например, если наблюдается полный гемолиз ЕА, значит, взаимодействия с IgG не произошло, отсутствие гемолиза, наоборот, означает полное взаимодействие C1q с IgG. Разная степень задержки гемолиза свидетельствует о различном количестве C1q, связавшихся с IgG. Определение РСК в присутствии IgG больных ХЛЛ и здоровых доноров показало, что фиксация комплемента молекулами IgG больных ХЛЛ в 0,6 М растворе сахарозы, способствующей их ассоциации, происходит на 20-40% сильнее, чем IgG здоровых лиц (р < 0,05 – р < 0,001). При этом Kd комплекса C1q-IgG больных ХЛЛ были значительно выше, чем у здоровых доноров, что свидетельствовало о большем взаимодействии IgG при патологии и с другими лигандами. В то же время, методом ИФА с использованием МкАТ было показано, что ассоциированные на полистироловом планшете IgG при ХЛЛ связывают C1q в 4,8-6,7 раз больше чем в контроле.

Таким образом, полученные результаты указывают на то, что при неопластических процессах происходит значительное увеличение количества лигандов, связывающихся с IgG, что в свою очередь является причиной снижения их комплементфиксирующей функции и возможно лежит в основе нарушения механизмов реализации противоопухолевой защиты организма.