Химия и химические технологии/ 4.Химико-фармацевтическое производство

К.т.н. Р.С. Ташменов, к.фарм.н. Ж.С. Токсанбаева

Южно-Казахстанская государственная медицинская академия,

г. Шымкент

Количественное определение флавоноидов пустырника сизого

Пустырник сизый (Leonurus glaucescens Bunge) – многолетнее травянистое растение рода Пустырник семейства Яснотковые с четырехгранным ветвящимся стеблем, достигающее 1,5 м в высоту. Растения этого рода широко применяются в народной медицине многих стран как сердечное и противокашлевое средство. Настой и настойка травы замедляют ритм сердца, увеличивают силу сердечных сокращений, снижают кровяное давление. Установлено, что препараты пустырника действуют успокаивающе на центральную нервную систему, причем сильнее настойки валерианы в 3-4 раза. Эти фармакологические свойства растения связывают с наличием в нем комплекса флавоноидных соединений.

Цель настоящего исследования –количественное определение суммы флавоноидов в траве пустырника сизого.

Экспериментальная часть

Исследовалась надземная часть пустырника сизого, собранного в период цветения в Толебийском районе Южно-Казахстанской области в 2002-2005 гг.

Содержание суммы флавоноидов в траве пустырника определяли фотоколориметрическим способом. Из измельченного сырья (аналитическую пробу сырья измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито (ТУ 23.2.2068-89) с диаметром отверстий 1 мм) брали навеску около 1,0 г (точная навеска), помещали в пакет из фильтровальной бумаги и обрабатывали хлороформом в аппарате Соксклета в течение 14 часов до обесцвечивания (20 сливов). Пакет высушивали на воздухе до исчезновения запаха хлороформа. Навеску количественно переносили в коническую колбу вместимостью 50 мл, прибавляли 10 мл 70 % спирта и нагревали 30 мин на кипящей водяной бане с открытым холодильником. Извлечения отфильтровывали в колбу вместимостью 50 мл, избегая попадания частиц сырья на фильтр. Экстракцию повторяли дважды порциями по 10 мл спирта. Полученные извлечения объединяли, упаривали на водяной бане при температуре 70^ОС под вакуумом до объема 6-7 мл, количественно переносили в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводили объем раствора 96 % спиртом до метки и перемешивали (раствор А).

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещали 1 мл 0,5 % раствора стрептоцида в 10% растворе кислоты серной, прибавляли 2 мл 0,2 % раствора натрия нитрита, взбалтывали 2 минуты, прибавляли 1 мл раствора А и 1 мл 10% раствора натра едкого, взбалтывали 1 минуту и доводили объем раствора до метки (раствор Б). Через 15 минут измеряли оптическую плотность раствора Б на фотоэлектроколориметре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 432 нм. В качестве раствора сравнения использовали раствор А, разбавленный 96 % спиртом без добавления реактивов.

По калибровочному графику находили концентрацию рутина в мг/мл.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в абсолютно сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

С ∙ 10 ∙25 ∙100∙100

х = ————————

m ∙ 1000 (100 – W)

где С – содержание рутина в колориметрируемом растворе, найденное по калибровочному графику, мг;

m – масса сырья, г;

W – потеря в массе при высушивании, %.

Построение калибровочного графика. Около 0,1 г (точная навеска) РСО рутина (ФС 42-2508-87) в пересчете на сухое вещество помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяли в 70% спирте и доводили объем раствора 70 % спиртом до метки. Из исходного раствора готовили ряд разведений концентраций рутина от 0,02 до 0,08 мг/мл.

Далее поступали согласно методике, приведенной выше. По результатам измерения оптической плотности растворов строили калибровочный график, откладывая по оси абсцисс концентрацию рутина в мг/мл, по оси ординат – оптическую плотность раствора.

Определение влажности травы пустырника.

Масса пустого бюкса - 25,44870

Масса бюкса с травой - 26,11775

Масса после высушивания - 26,06155

26,11775 - 25,44870 = 0,66905 0,66905 - 100 %

26,11775 - 26,06155 = 0,05620 0,05620 - х

0,05620 ∙ 100

х = ——————— = 8,3 %

0,66905

Определение количественного содержания рутина в сырье. Для проведения анализа взяли навеску (1,0001 г) измельченного сырья. Навеска стандартного образца рутина составила 0,10265 г, по построенному калибровочному графику определили, что оптической плотности Д равной 0,4 соответствует концентрация 0,03 мг\мл рутина.

Как показал анализ полученных данных, содержание флавоноидов в исследуемом сырье колеблется от 0,75 до 0,8 %.

Выводы

1. Разработана методика количественного определения в траве пустырника сизого суммы флавоноидов в пересчете на рутин фотоколориметрическим методом.

2. Установлено, что содержание суммы флавоноидов находится в пределах 0,75 - 0,8 %.

Литература:

1. Георгиевский В.П., Комисаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. Биологически активные

вещества лекарственных растений. – Новосибирск: Наука, 1990. – 336 с.