Біологічні науки/8.Фізіологія людини та
тварин
Вплив адреналіну,
преднізолону й пілокарпіну на вміст цинку та інсуліну в панкреатичних острівцях
к.б.н., доцент Григорова Н.В.
Україна,
Запоріжжя, Запорізький національний університет
Відомо, що два атоми цинку зв’язують шість молекул інсуліну [1, 6]. Припускають,
що такий комплекс накопичується в секреторних гранулах панкреатичних клітин В [2,
3]. Для вирішування цього питання нами проводились порівняльні дослідження
характеру змін вмісту цинку та інсуліну в клітинах В острівців при введенні в організм
мишей катехоламіна, лікарського препарату з глюкокортикоїдною активністю та
холінолітика. Для цитохімічного виявлення цинку в острівцях застосовували високочутливу
селективну реакцію 8 – (п-толуолсульфоніламіно) – хіноліну (8-ТСХ), інсулін
визначали забарвленням зрізів підшлункової залози альдегідфуксином.
У дослідах мишам уводили адреналін, преднізолон і пілокарпін. Перед забоєм
тварин у них визначали рівень цукру в крові. Шматочки підшлункової залози фіксували
в холодному ацетоні (для визначення вмісту цинку в острівцях) і в рідині Буена
(для цитохімічного виявлення в них інсуліну). У першому випадку шматочки
безпосередньо через ксилоли, суміш ксилолу з парафіном, доводили до парафіну. У
другому випадку шматочки перед зануренням їх у ксилоли витримували в спиртах
зростаючою міцності.
Зрізи
підшлункової залози де парафінували послідовним їх проведенням через ксилоли,
спирти, дистильовану воду. У випадку з фіксацією в рідині Буена зрізи
попередньо перед забарвленням обробляли окислювачем (сумішшю сірчаної кислоти
та перманганату калію) та відновником (розчином щавлевої кислоти).
Для цитохімічного визначення цинку на зрізи наносили ацетоновий розчин
8-ТСХ. Потім зрізи промивали дистильованою водою, замикали в гліцерин та
розглядали під люмінесцентним мікроскопом. На препаратах цинк визначали в
цитоплазмі В-інсулоцитів по жовто-зеленій люмінесценції (світлофільтри ФС-1 і
ЖС-18).
Для цитохімічного визначення інсуліну зрізи цинку на зрізи за забарвлювали
спиртовим розчином альдегідфуксину, промивали водопровідною водою, замикали в
гліцерин-желатін. На препаратах інсулін у клітинах В острівців визначали по
синьо-фіолетовому забарвленні цитоплазми.
Інтенсивність цитохімічних реакцій 8-ТСХ та альдегідфуксину оцінювали по В.В.Соколовському [4] та
Ф.Хейхоу й Д.Квагліно [5].
У мишей, отримавши адреналін і преднізолон, рівень цукру в крові був
підвищений на 93-115%, а вміст цинку в острівцях – на 37-42%, інсуліну – на
46-54%.
Пілокарпін викликав зниження глікемії на 43%, вмісту цинку – на 32%,
інсуліну – на 54%.
Таким чином, підвищення активності симпато-адреналової системи при введенні
адреналіну та преднізолону приводить до накопичення в панкреатичних клітинах В
цинку та інсуліну, що пояснюється пригніченням під впливом цих речовин
секреторної функції В-клітин острівців.
Зворотні результати отримані у випадку введення тваринам пілокарпіну, що є
антагоністом адреналіну. В результаті рівень цукру в крові знижується,
зменшується також вміст цинку та інсуліну в клітинах В острівців. Пояснюється
тим, що пілокарпін активує ваго-інсулярну систему, яка викликає підсилення
секреторної функції В-клітин.
Сходні зміни цинку та інсуліну в острівцях при введені різних речовин
підкріплюють положення про зв'язок цих двох компонентів у клітинах В. Видимо, в
комплексі з цинком інсулін депонується всередині секреторних гранул В-клітин
острівців. Під впливом секреторних стимулів цей комплекс розщеплюється, інсулін
легко виходить із гранул в екстра целюлярний простір. Цинк відщеплюється в
клітинах білком металотіонеїном.
1. Балаболкин М.И. Диабетология. - M.: Медицина, 2000. - 671с.
2. Берегова Т.В., Єщенко Ю.В. Зміни
вмісту цинку в клітинах при різних функціональних станах інсулярного апарата
підшлункової залози // Вісник ЗДУ. – 2003. - №1. – С.11-15.
3. Єщенко В.А. Гистохимическое исследование
цинка // Цитология. - 1978. – Т.20, №8. – С.927-933.
4. Соколовский В.В. Гистохимические исследования
в токсикологии.- Л.: Медицина, 1971. - 172c.
5. Хейхоу Ф., Кваглино Д. Гематологическая цитохимия.
- М.: Медицина, 1983. - 320с.
6. Chausmer A.B. Zinc, insulin and diabetes
// J. Am. Coll. Nutr. - 1998. - 17, №2. - P.109 - 115.