Медицина/1. Акушерство и гинекология

к.м.н. Ткачев В.Н., орд. Юрченко А.С., проф. Евтушенко И.Д.,

проф. Наследникова И.О., орд. Кублинский К.С.

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Сибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российский Федерации

СВЯЗЬ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА GSTT1 С ЭФФЕКТИВНОСТЬЮ ЛЕЧЕНИЯ ГЕНИТАЛЬНОГО ЭНДОМЕТРИОЗА

В настоящее время, в связи с нарастающей распространенностью, высокой частотой бесплодия составляющей от 20 до 50%, выраженным болевым синдромом, приводящим к снижению качества жизни, эндометриоз превращается в медико-социальную проблему [1, 4]. Наряду с общепринятыми теориями происхождения заболевания в последнее время большое внимание уделяется изучению воздействия экзогенных факторов на развитие и течение эндометриоза [2, 3, 4, 5, 6, 7]. Воздействия на окружающую среду полигалогеновых ароматических гидрокарбонов, включающие диоксины и полихлорированные бифенилы (РСВ), как предполагается, участвуют в развитии эндометриоза. Эти молекулы находятся в окружающей среде. Диоксины образуются во время горения органических материалов, являются побочным продуктом индустриальных процессов [3, 4, 5]. РСВ находятся в коммерческих продуктах, включая электрическое оборудование, краски, пестициды.

Действию этих повреждающих факторов противостоит работа системы биотрансформации ксенобиотиков, дисфункция которой приводит к нарушению антиоксидантной защиты с последующим окислительным стрессом, губительно действующего на клетку, запуская даже процессы канцерогенеза. Ферменты суперсемейства глутатион-S-трансфераз (GST) играют ключевую роль в обеспечении защиты от перекисного окисления липидов, свободных радикалов и т.д. Кроме того, они являются внутриклеточными переносчиками билирубина, гормонов, участвуют в синтезе простагландинов [3, 6, 7]. В связи с этим, изучение вклада ферментов системы биотрансформации ксенобиотиков в этиопатогенез эндометриоза, а также оценка эффективности медикаментозного лечения в зависимости от генетических особенностей пациенток представляется актуальным.

Материал и методы исследования. В программу исследования были включены 140 пациенток репродуктивного возраста от 19 до 43 лет (средний возраст 30,6±1,2 года) с генитальным эндометриозом, госпитализированные в гинекологическую клинику ГБОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России в 2009-2011 гг. для выполнения лечебно-диагностической и оперативной лапароскопии и гистероскопии. Диагноз эндометриоза был поставлен в результате осмотра брюшины и органов малого таза на наличие эндометриоидных очагов в ходе эндоскопических методов исследования, с последующим гистологическим подтверждением.

При поступлении в клинику пациентки предъявляли жалобы на бесплодие (средняя продолжительность 3,6±1,1 лет), которое у 66% пациенток было первичным, а у 34% женщин – вторичным. Кроме того, 74% пациенток жаловались на болевой синдром, 74% – на дисменорею, 38%  – на диспареунию, 36% – на нарушение менструального цикла по типу мено- и метроррагии. Наиболее часто, в 85% случаев, во время лапароскопии диагностировались малые формы эндометриоза, в то время как эндометриоидные кисты – в 64%, из них двусторонние в 30% случаев. Частота ретроцервикального эндометриоза составила 13%.

У всех женщин было получено добровольное информированное согласие на забор и использование крови для проведения исследований. Кровь для молекулярно-генетических методов исследования получали из кубитальной вены в стандартных условиях у всех пациенток утром в день операции. Стабилизированные образцы крови хранили при –70°С до момента исследования. Выделение ДНК из периферической крови проводили сорбентным методом согласно инструкции, прилагаемой к коммерческому набору «ДНК-сорб-В» («ИнтерЛабСервис», Россия). Типирование образцов по гену GSTT1 проводили при помощи аллельспецифической мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР). Амплификацию осуществляли согласно инструкции, прилагаемой к коммерческому набору «АмплиСенс-200-1» («ИнтерЛабСервис», Россия), в пробирках типа «Эппендорф» путём ПЦР, используя структуру праймеров и параметры температурных циклов, описанных в литературе при использовании амплификатора «Терцик МС2» («ДНК-технология», Россия).

Для анализа ассоциации маркеров исследуемого гена с эндометриозом сравнивали частоты аллелей и генотипов в группах женщин, используя критерий χ2 с поправкой Йетса на непрерывность. Об ассоциации разных генотипов и аллелей с заболеванием судили по величине отношения шансов (oddsratio (OR)) с расчетом для него 95% доверительного интервала (CI).

Результаты исследования. После проведения хирургической коррекции всем пациенткам было назначено медикаментозное лечение эндометриоза: 80% женщин получали комбинированные оральные контрацептивы, 20% – агонисты гонадотропин-рилизинг гормонов. Проведенная оценка эффективности лечения позволила установить, что наиболее эффективным методом медикаментозной терапии эндометриоза после предварительной хирургической коррекции оказалось назначение агонистов гонадотропин-рилизинг гормонов (рис. 1).

На следующем этапе исследования в зависимости от эффективности лечения все обследованные женщины были разделены на 2 группы: в первую вошли 55 пациенток (39%), медикаментозное лечение которых оказалось эффективным; во вторую группу – 85 женщин (61%), не отметивших улучшений после проведенной терапии.

Ген GSTТ1 кодирует аминокислотную последовательность фермента второй фазы биотрансформации ксенобиотиков θ1глутатион S-трансферазы, содержащегося в эритроцитах и участвующего в очистке организма от многих ксенобиотиков. В случае делеции гена GSTТ1 (частота в популяции 16-25%) образуются укороченные белковые продукты без выраженной ферментативной активности, что приводит к дисбалансу глутатион-опосредованной биотрансформации ксенобиотиков. В частности, нарушается инактивация эстрогенов и происходит накопление высокоактивных промежуточных метаболитов, лежащих в основе рецидивирования и неэффективного лечения эндометриоза [2, 3, 5, 6, 7].

*
 

*
 

Рис. 1. Эффективность медикаментозного лечения пациенток с генитальным эндометриозом (звездочкой отмечены достоверные различия р≤0,05).

 

Анализ частоты распределения вариантных генотипов гена GSTТ1 у пациенток с эндометриозом в зависимости от эффективности медикаментозного лечения позволил выявить статистически значимые отличия. Обращала на себя внимание значимо высокая частота встречаемости делеционного генотипа 0/0 гена GSTТ1 (80,00%, р=0,005) у пациенток с генитальным эндометриозом, лечение которых было неэффективным (табл. 1).

Таким образом, эффективность медикаментозной терапии эндометриоза коррелирует с особенностями полиморфизма гена GSTТ1 – «функционально неполноценный» генотип 0/0 GSTТ1 (OR=2,17) ассоциирован с низкой эффективностью медикаментозного лечения генитального эндометриоза. Целесообразно назначение медикаментозной терапии эндометриоза  с учетом особенностей генетического полиморфизма организма пациентки.

 

Таблица 1.

Частота встречаемости генотипов гена GSTТ1 у пациенток с генитальным эндометриозом в зависимости от эффективности лечения (в абс. знач. и %)

Ген

Генотип

Пациентки с генитальным эндометриозом

р, χ2

Эффективное лечение, n=55

Неэффективное лечение, n=85

GSTТ1

+

43 (78,18%)

 

17 (20,00%)

χ2=2,91

р=0,005

0/0

12 (21,82%)

 

68 (80,00%)

 

Тестирование генов второй фазы системы детоксикации может рассматриваться не только как метод выявления женщин с наследственной предрасположенностью к генитальному эндометриозу, но и как метод прогнозирования результатов эффективности гормонотерапии и выработки стратегии медикаментозной терапии. Ферменты детоксикации являются перспективной терапевтической мишенью и представляет большой интерес для патогенетически обоснованного лечения эндометриоза.

 

Литература:

1.   Адамян Л.В., Кулаков В.И., Андреева Е.Н. Эндометриозы. – М.: Медицина. 2006. – 416 с.

2.   Адамян Л.В., Спицын В.А., Андреева В.Н. Генетические аспекты гинекологических заболеваний. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. – 192 с.

3.   Артымук Н.В., Харенкова Е.Л., Иленко Е.В., Гуляева Л.Ф. Полиморфизм ферментов метаболизма эстрогенов у женщин с гиперпластическими процессами в эндометрии в период перименопаузы // Российский вестник акушера-гинеколога. – 2009. – №2. – С. 17-20.

4.   Ищенко А.И., Кудрина Е.А. Эндометриоз: диагностика и лечение. – М.: МИА. 2008. – 176 с.

5.   Ступко Е.Е., Шенин В.А., Колесникова Л.И., Лабыгина А.В., Сутурина Л.В. Роль полиморфизмов генов детоксикации ксенобиотиков в развитии миомы матки и эндометриоза // Сибирский медицинский журнал. – 2011. – №5. – С. 5-8.

6.   Babu K.A., Reddy N.G., Deendayal M. GSTM1, GSTT1 and CYP1A1 detoxification gene polymorphisms and their relationship with advanced stages of endometriosis in South Indian women // Pharmacogenet Genomics. – 2005. –V. 15, №3. – Р. 167-72.

7.   Sung E.H., Ji Y.L., Hye-Sung M. Polymorphisms of the genes encoding the GSTM1, GSTT1 and GSTP1 in Korean women: no association with endometriosis // Molecular Human Reproduction. – 2005. – V. 11, №1. – P. 15-19.