Кенжебаева А.Т., Шуратов И.Х., Оракбай Л.Ж., Джумагалиева А.Б., Аласкулова Г.Д., Алимгазиева А.М.

Научный центр гигиены и эпидемиологии имени Хамзы Жуматова КГСЭН МЗ РК, Алматы, Республика Казахстан

РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ НА УРБАНИЗИРОВАННЫХ ТЕРРИТОРИЯХ

Целью исследования явилось: изучение заболеваемости острыми кишечными инфекциями и забор проб почвы и воды на территории г.Актау и области с целью обнаружения микроорганизмов семейства энтеробактерий, в первую очередь сальмонелл, неферментирующих грамотрицательных микроорганизмов (псеудомонас, моракселла, ацинетобактер и др.), стафилококков, широко распространенных в объектах окружающей среды.

Материалы и методы. Отбор проб почвы проводился с учетом функциональных зон города. Было отобрано по 2 пробы с каждого объекта. Всего было 29 объектов.

Пробы собирали с соблюдением стерильности в контейнеры с притертыми крышками. Объединенную пробу составляли из равных по объему точечных проб, которую в лаборатории освобождали от посторонних примесей, тщательно перемешивали и делили на части для проведения анализа. Образцы почвы перед посевом диспергировали, перемешивали и готовили навески. Первое разведение навески почвы (1:10) делали в стерильной посуде, добавляя стерильную дистиллированную воду в соотношении 1:10 к весу почвы. Почвенную суспензию, содержащую в 1 мл 0,1 г почвы, после предварительной обработки (вертикальное встряхивание почвенной суспензии первого разведения для оседания грубых минеральных частиц) использовали для приготовления последовательно убывающих концентраций почвы. Для этого из первого разведения, находящегося во флаконе, с содержанием почвы 0,1 г/мл отбирали стерильной пипеткой 1 мл и переносили в пробирку с 9 мл стерильной дистиллированной воды. При этом получали второе разведение, содержащее 0,01 г/мл почвы. Повторяя эту операцию получали разведение почвы до 0,0001 г/мл.. Приготовленные децимальные разведения использовали для посева почвы на питательные среды ВСА (висмут-сульфитный агар), SS-агар ( среда Плоскирева ), среда Эндо, с последующим пересевом на среду Ресселя, а также жидкие среды- селенитовый бульон и среда Кода. Чашки с посевами помещали в термостат на 24 часа при температуре 37°.  Из отдельных колоний приготавливали мазки и окрашивали их по Граму. У грамотрицательных палочек проверяли оксидазную активность. Отсутствие роста на чашках свидетельствовало об отрицательном результате. Идентификацию выросших на агаризованных средах характерных колоний и изучение биохимических свойств проводили с использованием СИБ производства Н.Новгород и других тестов (гемолиз, лецитин и др.). Для серотипирования кишечных палочек использованы диагностические адсорбированные сыворотки различных серогрупп.

С целью определения сальмонелл в почве помимо агаризованных сред использована селенитовая среда накопления. Дальнейшая идентификация сальмонелл проводится по общепринятой методике. Посевы инкубировали в термостате при температуре 37°. Через 18 - 20 часов производили высев петлей на чашки с висмут-сульфитным агаром.

Санитарно-бактериологическую оценку почвы проводили по следующим показателям: МАФАнМ - мезофильно-аэробные и факультативно анаэробные микроорганизмы (общее микробное число - ОМЧ или сапрофитные микроорганизмы); коли-титр (определение титра бактерий группы кишечных палочек) - показатель фекального загрязнения.

Определение микробного числа (МАФАнМ КОЕ/см³ (г)) воды, коли-титр определяли совместно с работниками санэпидслужбы г.Актау .

При исследовании морской и сточной воды проводили высев в чашки Петри в глубину агара и с последующим подсчетом выросших колоний (бродильный метод). Наличие и количественный учет кишечных палочек определяли бродильным методом. Сущность метода заключается в посеве определенных объемов анализируемой воды в среды накопления и подращивания при температуре 37 ±0,5°С с последующими пересевом на плотную питательную среду Эндо и дифференциацией выросших бактерий. Пробы воды и их разведения высевали по 1,0 ( в соотношении 1:10) в глюкозопептонную среду (ГПС) На следующий день производили пересев на среду Эндо. Чашки с посевами помещали в термостат и инкубировали при температуре 37 ±0,5°С в течение 24 - 48 ч.

При росте на среде Эндо темно-красных колоний с металлическим блеском их принадлежность к БГКП подтверждали микроскопированием мазков, окрашенных по Граму, и постановкой оксидазного теста. Наличие мелких неспорообразующих грамотрицательных палочек в мазках и отрицательный оксидазный тест позволяют дать заключение о содержании кишечной палочки в анализируемой пробе воды. Определение титра БГКП (коли-титра) проводят установлением наименьшего количества воды, в котором находится одна кишечная палочка.

Для серотипирования кишечных палочек использованы диагностические адсорбированные сыворотки различных серогрупп.

Результаты исследования.

Анализ заболеваемости острыми кишечными инфекциями в г. Актау в период 2005-2010 г.г. показал, что наиболее высокие показатели регистрировали в 2009 г. – 722 человека по городу и 1724 – по области и низкие показатели зарегистрированы в 2010 году.

В таблице 1 представлены данные по заболеваемости в г. Актау и в целом по области по острым кишечным инфекциям.

Таблица1-Заболеваемость острыми кишечными инфекциями в г.Актау и Мангистауской области

Насел пункт	2005		2006		2007		2008		2009		2010
г.Актау	444	221,5	442	198,4	425	200,4	361	166,9	722	328,8	271	121,9
Область	465	182,1	676	159,0	805	161,9	787	152,3	1724	318,3	669	120,0

Наиболее поражаемыми контингентами были неорганизованные дети. Показатель заболеваемости ОКИ в изучаемый период составил 979,4 на 100 тыс населения (60,6 % ) в 2007 г. по г. Актау . При этом , из всех возрастных групп чаще болели дети 1-2 лет ( показатель -165 ,1 на 100 тыс. населения).

Установлено, что в Мангистауской области шигеллезы регистрируют ежегодно. В таблице 2 представлена заболеваемость населения шигеллезами в г. Актау и Мангистауской области период 2005-2010 г.г.

Таблица 2 – Заболеваемость населения дизентерией в г.Актау и Мангистауской области

Насел пункт	2005		2006		2007		2008		2009		2010
г.Актау	127	63,4	120	53,9	74	34,9	361	166,9	98	44,6	44	19,4
Область	137	34,6	143	33,6	140	28,2	787	152,1	155	28,6	90	16,1

Как представлено в таблице 2 по области показатель заболеваемости в изучаемый период колебался от 16,1 до152 ,1 на 100 тыс. жителей. Регистрация шигеллезов по области проводится в соответствии с международной классификацией шигелл по группам А,В,С,Д.

В период 2005-2010 в целом по области самую большую группу в этиологической структуре представляли шигеллы гр. В (S.flexneri) , которые составили от 66,7 до 84 ,9 %. Вторую группу по значимости представляли шигеллы группы Д (S.sonne - от 13,5 до 33,3 %).Роль шигелл групп А и С имела тенденцию к снижению.

Оценка опасности загрязненной почвы и воды населенных пунктов определяется: эпидемической значимостью, а также ролью ее как источника вторичного загрязнения приземного слоя атмосферного воздуха и при непосредственном контакте с человеком Биологическое загрязнение почв обусловленное диссеминацией возбудителей кишечных инфекций, в частности энтеробактериями, свидетельствует о фекальном загрязнении почв.

Санитарно-бактериологическую оценку образцов почвы в г. Актау проводили по следующим показателям: определение микробного числа МАФАнМ. МАФАнМ – мезофильно – аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы (общее микробное число – ОМЧ или сапрофитные микроорганизмы).

Установлено, что наибольшую группу составили пробы с МАФАнМ=10/2 и 10 /4 степеней разведения. К слабозагрязненным образцам отнесены 20,8% проб. Санитарно-показательными являются условно-патогенные микроорганизмы, наличие которых свидетельствует о возможном загрязнении объекта патогенными бактериями, поражающими те же органы, ткани и полости организма человека и животных, в которых обитают и эти условно-патогенные микроорганизмы. Обнаружение таких микроорганизмов в объектах внешней среды свидетельствуют о загрязнении их экскрементами человека или животных, а количественный учет позволяет определить массивность загрязнения и степень эпидемической опасности объекта.

Санитарно-показательными микроорганизмами почвы являются представители нормальной микрофлоры кишечника. Это связано с тем, что бактерии, обитающие в кишечнике человека, как и патогенные энтеробактерии – возбудители острых кишечных инфекций, распространяющиеся фекально-оральным путем.

Наличие БГКП в 0,1 мл почвы выявлено в 44,8 % случаев, 20,7 % положительных проб БГКП обнаружено в 0,01 мл почвы и в 7% БГКП выявлены в 0,001 мл почвы. БГКП в 0,1 мл почвы не обнаружены в 27,5 %.

Разные сроки выживаемости бактерий в окружающей среде позволяют определить давность фекального загрязнения. Так ,E. Coli выживает несколько дней и ее обнаружение свидетельствует о свежем фекальном загрязнении. Обнаружение бактерий родов Citrobacter, Enterobacter, сохраняющиеся неделями и месяцами, расценивается как несвежее фекальное загрязнение, а бактерии вида C.perfringens (в почве) – как давнее загрязнение почвы. В число представителей рода Clostridium входят возбудители газовой гангрены, столбняка, ботулизма.

В 58,6 % исследованных нами проб C.perfringens не обнаружены и в 41,4 % случаев выявлены, что свидетельствует о давнем загрязнении почвы.

Спектр микроорганизмов, выявленных при исследовании проб почвы г. Актау представлен в таблице 3.

Таблица 3- Спектр микроорганизмов, выявленных при исследовании проб почвы г. Актау

	Микроорганизмы	% среди проб почвы
1.	Hafnia	10,3
2.	Eschrichia	48,2
3.	Proteus	13,7
4.	Staphilococcus.	20,7
5.	Грамотрицательные неферментирующие микроорганизмы	93,1
6.	Aspergillus	41,3
7.	Pseudomonas aeruginosa	10,3

При серотипировании микроорганизмов рода Eschrichia выявлены 055.

Проведенные исследования показали ,что во всех пробах почвы, собранных по г.Актау не выявлено наличие сальмонелл в разведениях от 0,1 г/мл до 0,0001/

Таким образом, при исследовании проб почв г. Актау наиболее многочисленную группу среди микроорганизмов, выделенных из почвы составили неферментирующие бактерии, бактерии рода Eschrichia, Aspergillus.

Проведенные исследования проб питьевой воды не выявило наличие микроорганизмов: ОМЧ=0 кое, общие колиформные бактерии в 100 мл отсутствовали, БОЕ (число бляшкообразующих единиц) отсутствовало в 100мл воды. Эти же показатели в морской и сточной воде находились в пределах многолетних и характерных для данной местности микробиологических показателей.

Проведенные исследования показали, что во всех пробах воды, собранных по г. Актау не выявлено наличие сальмонелл в разведениях от 0,1 г/мл и выше.

ВЫВОДЫ

1. Анализ заболеваемости острыми кишечными инфекциями в г. Актау в период 2005-2010 г.г показал, что наиболее высокие показатели регистрировали в 2009 г. – 722 человека по городу и 1724 – по области и низкие показатели зарегистрированы в 2010 году.

2. В период 2005-2010 в целом по области самую большую группу в этиологической структуре представляли шигеллы гр. В (S.flexneri), которые составили от 66,7 до 84 ,9 %. Вторую группу по значимости представляли шигеллы группы Д (S.sonne - от 13,5 до 33,3 %). Роль шигелл групп А и С имела тенденцию к снижению.

3. Наличие БГКП в 0,1 мл почвы выявлено в 44,8 % случаев, 20,7 % положительных проб БГКП обнаружено в 0,01 мл почвы и в 7% БГКП выявлены в 0,001 мл почвы. БГКП в 0,1 мл почвы не обнаружены в 27,5 %.

4. В 58,6 % проб C.perfringens не обнаружены и в 41,4 % случаев выявлены, что свидетельствует о давнем загрязнении почвы.

5. Исследования проб питьевой воды не выявило наличие микроорганизмов: ОМЧ=0 кое, общие колиформные бактерии в 100 мл отсутствовали, БОЕ (число бляшкообразующих единиц) отсутствовало в 100мл воды. Эти же показатели в морской и сточной воде находились в пределах многолетних и характерных для данной местности микробиологических показателей.