Биологические науки/8. Физиология человека и животных

К.б.н. Бондарева Н.И.

Ставропольский государственный университет, Ставрополь, Россия
Южный научный центр РАН, Ростов-на-Дону, Россия

Гистологическая характеристика селезенки потомства крыс сенсибилизированных во время беременности

Очень важной составляющей нормального эмбрионального развития потомства является здоровье матери. Беременность и раннее развитие ребенка должны исследоваться и оцениваться с точки зрения единства матери и плода (Ахмина Н.И., 2005). Поэтому особую актуальность приобретают исследования влияния неблагоприятных факторов на материнский организм, развитие плода в этих условиях и исход беременности.

Для оценки конкретных морфофункциональных особенностей у новорожденных важны сведения о сроках начала и завершения развития структур, интенсивности их развития, формах морфологической и функциональной перестройки. В каждом конкретном случае важно определить, имеем ли мы дело с незавершенным нормальным развитием той или иной структуры и функции или это отклонение от нормального развития, вызванное влиянием неблагоприятного фактора. В связи с этим период новорожденности представляет значительный интерес так, как является отражением всех закономерных и случайных изменений, происходящих во внутриутробный период развития организма. Влияние на плод любых осложнений беременности, прежде всего, определяется состоянием потомства при рождении и особенностями в раннем неонатальном периоде.

Так как течение раннего неонатального периода характеризуется состояниями, которые связаны с первичной адаптацией новорожденного к окружающей среде и установлением нового типа гомеостаза, то наибольший интерес при изучении составляют те системы, которые обеспечивают данные процессы. Одной из таких систем является иммунная. К концу плодного периода, к моменту рождения органы иммунной системы достигают достаточной морфологической зрелости и в состоянии выполнять защиту организма от генетически чужеродных веществ. Например, такой орган иммунной системы как селезенка, к моменту рождения в основном сформирована, однако процесс дифференцировки ее тканевых элементов продолжается и после рождения.

В качестве экспериментального животного в работе были использованы половозрелые самки крыс массой около 140 г. Самок крыс (n=120) сенсибилизировали до скрещивания путем подкожного четырехкратного введения 0,1 мл неразбавленного амброзийного аллергена с гидроокисью алюминия в соотношении 1:1 с трехдневным интервалом. Введение данного антигена осуществлялось в одно и то же время суток. Для подтверждения сенсибилизации производили соответствующее комплексное исследование, состоящее из визуальной клинической оценки, количественной оценки иммуноглобулинов, в том числе специфического IgЕ, который служит информативным диагностическим тестом, позволяющим с определенной степенью вероятности выявить атопическую этиологию при неясных клинических формах заболевания, подсчете количества эозинофилов в мазках крови, проведения кожных скарификационных тестов.

Самки, у которых отмечены признаки сенсибилизации были отобраны в эксперимент и оплодотворены (n=60). Учитывая то, что материнский организм может контактировать с аллергеном, как до беременности, так и на ее сроках, часть самок (n=30) сенсибилизировали повторно. В качестве разрешающей дозы им вводили 0,1 мл неразбавленного амброзийного аллергена с гидроокисью алюминия в соотношении 1:1 однократно на 10-11 сутки беременности. Целесообразность выбора 10-11 суток обусловлена критичностью данного периода в связи с возможностью антенатального повреждения отдельных органов и систем (Светлов П.Г., 1978).

Таким образом, были сформированы рабочие группы. Первая группа (n=30) – самки крыс, сенсибилизированные только до беременности. Вторую группу (n=30) составили самки, которым аллерген вводили до и во время беременности. Контролем служили несенсибилизированные самки – третья группа (n=30). Крысята, полученные от самок этих групп, составили основные экспериментальные группы. Первая группа (n=215) – потомство крыс, сенсибилизированных только до беременности. Вторая группа (n=200) – потомство самок, сенсибилизированных до и во время беременности. Третья группа (n=240) – потомство несенсибилизированных самок.

Гистологическое исследование проведено по общепринятой технологии с окраской гематоксилин-эозином.

При гистологическом исследовании установлено, что опорно-сократительный аппарат селезенки в контрольной группе крысят представлен тонкой соединительнотканной капсулой, с нежной волокнистой структурой и крупными клетками преимущественно фибробластического происхождения. Трабекулы единичные, тонкие, едва заметные, не глубоко проникающие в центр органа. Трабекулярная сосудистая сеть и красная пульпа слабо развиты. Основную часть площади паренхимы занимает белая пульпа, представленная диффузными лимфоидно-клеточными скоплениями. Однако пролиферативная активность клеток, а следовательно, и плотность ткани сравнительно низкая. Лимфатические фолликулы отсутствуют. Среди клеток преобладают лимфоциты, преимущественного малого и среднего диаметра. Периартериальные клеточные муфты вокруг видимых сосудов слабые. Синусоиды умеренно развиты и расширены.

Оценка гистологической структуры селезенки крысят обеих опытных групп, свидетельствует в целом, об идентичности изменений и подтвердила стимулирующее, а в отдельных случаях во второй группе и патологическое влияние на ткани формирующегося органа. Наряду с увеличением массы органа в этих группах, отмечено более интенсивное формирование соединительной ткани. Капсула утолщена, рыхлая, отечная, неровная, в отдельных случаях с грубыми волокнистыми элементами, иногда обильно инфильтрирована клетками. У ряда животных второй группы, имеющих в крови специфический Ig E, обнаруживаются достаточно четко сформированные и расширенные трабекулы и трабекулярные артерии и вены, вокруг которых выражены периартериальные лимфоидные муфты. В этой группе животных среди клеток, кроме лимфоцитов, присутствует значительное количество макрофагов с темно окрашенными включениями. В отдельных срезах уже просматриваются слабо сформированные лимфатические фолликулы. Красная пульпа, как в первой, так и во второй группе развита значительно интенсивнее, чем в контрольной.

У отдельных крысят, преимущественно во второй группе, в большом количестве по всей поверхности среза расположены желтовато – коричневые участки отложений гемосидерина. Плотность клеток паренхимы селезенки крысят обеих опытных групп при визуальной оценке выше, чем у контрольных животных.

При гистологическом исследовании установлено, что в селезенке потомства сенсибилизированных самок обеих групп наиболее характерными являются гиперпластические изменения и нарушения дифференцировки. При наличии специфического IgE в крови, отмечены отек и разрыхление капсулы и септ, периваскулярные и перикапсулярные инфильтраты и гемосидероз.

Таким образом, установлены нарушения развития у плода, пренатальное развитие которого проходило в условиях сенсибилизации материнского организма. Вероятность этих нарушений не зависит от срока контакта матери с разрешающей дозой аллергена по отношению к беременности, однако интенсивность повреждений и патологических процессов при дополнительном контакте с аллергеном во время беременности значительно выше.

Литература:

1. Ахмина, Н.И. Антенатальное формирование здоровья детей / Н.И. Ахмина. – М.: МЕДпресс-информ, 2005. – 208 с.

2. Светлов, П.Г. Физиология (механика) развития: Процессы морфогенеза на клеточном и организменном уровнях. В 2 т. /

П.Г. Светлов. – Л.: Наука, 1978. – Т. 1. – 278 с.