Биологические науки/8. Физиология человека и животных

к.м.н. Івасюк І. Й., к.б.н. Спаська А. М.

Прикарпатський національний університет імені Василя Стефаника

Стан звивистих сім’яних трубочок в різні терміни

після біопсії яєчка в експерименті

Розлади сперматогенезу у чоловіків репродуктивного віку можуть розвинутись в результаті впливу на яєчко різноманітних факторів: дія високої і низької температури, розладів артеріального і венозного кровообігу, побутових та спортивних травм [1-4]. В ряді випадків в клініці з метою поточнення діагнозу і вибору методу лікування безпліддя застосовується біопсія яєчка. Разом з тим, вплив діагностичної біопсії на сперматогенез мало вивчений.

Робота виконана на 20-ти статевозрілих лабораторних щурах, яким під загальним ефірним наркозом здійснювали біосію яєчка, а його тканини вивчали через 1, 7, 14, 30 та 90 діб від початку операції. Забрані тканини яєчка фіксували в рідині Буена та Ценкер-формолі, заключали у парафінові блоки, зрізи з яких товщиною 5 – 7 мкм забарвлювали гематоксилін-еозином та реактивом Шифф-йодна кислота з дофарбовуванням гематоксиліном Ерліха.

При мікроскопічному дослідженні гістологічних препаратів яєчка оцінювали стан власної оболонки звивистих сім’яних трубочок, визначали їх діаметр і ступінь пошкодження клітин сперматогенного епітелію, об’єм ядер клітин Лейдіга. Отримані морфометричні показники піддали статистичній обробці.

Через одну добу після проведеної операції біопсії яєчка статевозрілих білих щурів їх маса збільшується до 1234,71 ± 19,46 мг, проти 1149,85±21,23мг на інтактній стороні, що можна пояснити післяопераційним набряком. У місці хірургічного втручання в паренхімі яєчка наявні мікрогематоми, судини гемомікроциркуляторного русла мають розширений просвіт. Діаметр звивистих сім’яних трубочок дорівнює 178,93 ± 2,46 мкм, їх власна оболонка потовщена за рахунок набряку. У міжканальцевій сполучній тканині скупчуються лімфоцити та інші форми лейкоцитів. Ядра клітин Лейдіга ’’набрякають’’ і їх об’єм збільшений до 91,06 ± 3,89 мкм³ проти 84,08 ± 2,31 мкм³ в контролі. У цій ділянці звичну будову мають тільки 7% звивистих сім’яних трубочок. У більшості сім’яних трубочок виражений важкий ступінь пошкодження клітин сперматогенного епітелію (табл. 1), а в інших трубочках до їх власної оболонки прилягає 1 – 2 шари клітин. У суміжних з хірургічним втручанням ділянках паренхіми яєчка у звивистих сім’яних трубочках спостерігається відшарування пластів епітелію від власної оболонки та перетворення їх в клітинний детрит.

Через сім діб після біопсії яєчка їх маса зменшується до 950,5±15,41мг. У місці біопсії щільність судин гемомікроциркуляторного русла зростає у зв’язку з атрофією звивистих сім’яних трубочок. Капілярна сітка деформована, а просвіт мікросудин у різних їх ділянках нерівномірний – звужені ділянки чергуються з розширеними. Діаметр звивистих сім’яних трубочок зменшився до 160,01 ± 0,79 мкм. Кількість звивистих сім’яних трубочок з важким ступенем пошкодження статевих клітин досягає 47%, сперматоцити на стадії прелептотени, пахітени і сперматиди тут відсутні. 37% звивистих сім’яних трубочок ”спустошені” (табл. 2). Власна оболонка сім’яних трубочок потовщена. Інтерстиційна тканина з явищами набряку. Об’єм ядер клітин Лейдіга зменшується до 76,31 ± 2,15 мкм³.

Через 14 діб після біопсії яєчка дистрофічні явища в його паренхімі наростають. Так, маса органа становить 907,46 ± 13,69 мг, а паренхімні мікросудини в місці операційного втручання деформовані, капіляри переплетені між собою, утворюють клубки. Діаметр звивистих сім’яних трубочок зменшуються до 148,35 ± 0,72 мкм. Їх власна оболонка потовщена, а в просвіті епітеліальні клітини відсутні. В інтерстиції розростаються сполучнотканинні елементи. В суміжних ділянках паренхіми звивисті сім’яні трубочки деформовані, до їх власної оболонки прилягають 1 - 2 шари незрілих епітеліальних клітин, обєм ядер клітин Лейдіга зменшується до 74,36±3,28мкм³.

Таблиця 1

Показники ступеня пошкодження звивистих сім’яних трубочок, їх діаметрів та об’єм ядер клітин Лейдіга в яєчку щурів після його біопсії (M + m; n = 5)

Тривалість досліду	Об’єкти, що вивчалися
	Звичай-ні	Ступінь пошкодження сім’яних трубочок (%)			Діаметри сім’яних трубочок (мкм)	Об’єм ядер клітин Лейдіга (мкм^3)
		лег- кий	важ- кий	спусто-шені
Контроль	95	5	–	–	197,24 ± 5,28	84,08 ± 2,31
1 доба	7	23	44	26	178,93 ± 2,46	90,06 ± 3,89
7 діб	4	12	47	37	160,01 ± 0,79	76,31 ± 2,15
14 діб	3	10	36	51	148,3 ± 0,72	74,36± 3,28
30 діб	5	7	31	57	123,4 ± 2,09	75,63 ± 2,32
90 діб	5	6	30	59	127,5 ± 1,94	75,48 ±3,07

Через 30 діб після біопсії маса яєчка дорівнює 938,27 ± 19,51 мг. Сітка судин гемомікроциркуляторного русла в місці операційного втручання деформована, або не визначається. Просвіт судин, що збереглися, місцями значно розширений або, навпаки, звужений. Діаметр звивистих сім’яних трубочок зменшується до 123,40 ± 2,09 мкм, вони мають неправильну форму, а клітини сперматогенного епітелію в них відсутні. В інтерстиції збільшується кількість сполучнотканинних елементів. Об’єм ядер клітин Лейдіга, що збереглися, зменшується до 75,31 ± 2,60 мкм³. У прилягаючих до ділянок біопсії звивистих сім’яних трубочках кількість сперматоцитів та сперматид значно зменшена (табл. 2).

Через 90 діб після операції біопсії яєчка його маса є значно меншою, порівняно з інтактним органом (972,53 ± 16,48 мг). Гемомікроциркуляторне русло паренхіми яєчка значно деформоване, місцями утворює густу, невпорядковану сітку. Спостерігається атрофія звивистих сім’яних трубочок, діаметр яких складає всього 127,5 ± 1,94 мкм. У місці біопсії яєчка переважають ’’спустошені’’ звивисті сім’яні трубочки та трубочки з важким ступенем пошкодження сперматогенного епітелію. Об’єм ядер клітин Лейдіга зменшується до 75,48 ± 3,07 мкм³.

Таблиця 2

Кількість клітин на VII стадії циклу сперматогенного епітелію

в яєчку статевозрілих білих щурів після його біопсії (М ± m; n=5)

Строк спостере-ження після біопсії	Вид клітин
	сперматогонії типу А	сперматоцити на стадії прелептотени	сперматоцити на стадії пахітени	сперматиди 7 етапу розвитку
Контроль	9,02 ± 0,66	230,58 ± 2,52	299,82 ± 4,43	916,76 ± 22,6
1 доба	8,10 ± 0,27	143,0 ± 6,27	129,3 ± 9,72	558,31 ± 23,17
7 діб	5,68 ± 0,53	173,49 ± 5,63	104,32 ± 7,64	209,38 ± 18,45
14 діб	5,27 ± 0,49	125,52 ± 6,49	89,71 ± 4,56	177,69 ± 8,91
30 діб	5,37 ± 0,32	146,03 ± 4,33	133,86 ± 8,61	173,18 ± 9,32
90 діб	5,42 ± 0,73	139,08 ± 5,26	126,35 ± 5,37	170,30 ± 8,63

Отже, біопсія яєчка є для нього хірургічною мікротравмою. Вже через сім діб ця операція призводить до зменшення маси органа на 23%, діаметрів звивистих сім’яних трубочок – на 14%, об’єму ядер клітин Лейдіга – на 10%. В ділянці біопсії яєчка у звивистих сім’яних трубочках у 3 рази зменшується, порівняно з нормою, кількість сперматоцитів і сперматид 7 етапу розвитку. Названі морфометричні показники залишаються низькими і через 30 та 90 діб після біопсії яєчка.

Література:

1. Божедомов В.А., Теодорович О.В. Эпидемиология и причины аутоимунного мужского бесплодия // Урология. – 2005. - №1. – С. 35-44.

2. Грицуляк Б.В., Грицуляк В.Б. Гіпоксія і сперматогенез. – Івано-Франківськ: Плай, 2000. – 120 с.

3. Грицуляк Б.В., Грицуляк В.Б., Івасюк І.Й. Травмоване яєчко. - Івано-Франківськ: ВДВ ЦІТ Прикарпатського нац. ун-ту, 2006. – 116 с.

4. Грицуляк Б.В., Спаська А.М., Грицуляк В.Б. Орхоепідидиміт: - Івано-Франківськ: ВДВ ЦІТ Прикарпатського нац. ун-ту, 2008. – 188 с.