Воронина О.Н.

Педагогический Институт Южного Федерального Университета, Россия

Про- / анти- оксидантные свойства диметилдипиразолилселенида (ДМДПС), селенида натрия (Na₂Se) и вещества Х-1 в модельных системах при изучении функционального состояния организма.

Изучено воздействие ДМДПС, Na₂Se и вещества Х-1 на интенсивность СРП и ПОЛ в модельных системах липопротеинов желтка куриного яйца и крови человека. Показано, что названные вещества вызывали изменения этих процессов, которые зависели от концентрации и модельной системы. ДМДПС в биоэффективной концентрации снижает уровень МДА в модельной системе липопротеинов желтка куриного яйца, что может свидетельствовать о наличии у данного соединения антиоксидантных свойств на стадии ПОЛ.

Согласно современным представлениям, процессы с участием свободных радикалов протекают в две стадии: собственно свободно-радикальный период и развивающийся вслед за ним период перекисного окисления биомолекул, в первую очередь - липидов. Об интенсивности разных стадий судят по ряду показателей, из которых наиболее часто используются два. Хемилюминесценция (ХЛ) является интегральным показателем свободно-радикального периода, а по содержанию малонового диальдегида (МДА) оценивают интенсивность ПОЛ.

Предыдущими исследованиями установлена одна биоэффективная концентрация ДМДПС – 33 мг/кг. Для остальных веществ данные о биоэффективных концентрациях отсутствуют.

В первой модельной системе – липопротеинах желтка куриного яйца – исследованы следующие концентрации ДМДПС – биоэффективная (33 мг/л), а также концентрации, отличающиеся от этой - 330 и 3,3 мг/л. Остальные вещества исследованы в тех же концентрациях.

Во второй модели – цельной крови человека – исследовано по одной концентрации: ДМДПС – 33 мг/л; Na₂Se и X-1 3,3 мг/л.

Интенсивность свободно-радикальной стадии определяли методом Fe-инициированной ХЛ. Определяли фоновое свечение (фон), аплитуду быстрой вспышки (h); амплитуду максимальной вспышки (Imax), светосумму за 5 мин (Sm), а также тангенс угла наклона кривой (tqα).

Количество МДА опре5деляли колориметрическим способом с 2-тиобарбитуровой кислотой (Стальная, Гаришвили, 1977).

Постановка эксперимента. Оценка про-/ анти- оксидантных свойств трех веществ проведена в двух модельных системах: липопротеины желтка куриного яйца и кровь человека. Желток яйца является природным источником биологических липидов, легко подвергающихся процессу ПОЛ, а кровь является интегральным показателем состояния организма в целом. Из желтка куриного яйца готовили 10% суспензию липопротеинов на физиологическом растворе. Кровь разводили вдвое физиологическим раствором. К 4 мл биосубстрата приливали 1 мл исследуемого вещества (для получения различных конечных концентраций использовались разные исходные концентрации), пробу премешивали и инкубировали 1 час при +37⁰С. После инкубации определяли искомые параметры. В контрольную пробу (бланк) вместо вещества приливали 1 мл физ. раствора. В первой модели (желток) все параметры определяли в суспензии. Во второй модели, после инкубации кровь центрифугировали, и в плазме определяли ХЛ и МДА, а в суспензии эритроцитов – только МДА.

Модель I - липопротеины желтка куриного яйца. Все вещества повышали те или иные показатели ХЛ. Неизменным оставался только показатель tqά. Наиболее сильный стимулирующий эффект у всех веществ проявился в концентрации 33 мг/л. Таким образом, все вещества в данной модели не обладают свойствами молекулярных антиоксидантов на радикальной стадии. ДМДПС в концентрациях 330 и 3,3 мг/л повышал содержание МДА, а в концентрации 33 мг/л - снижал его уровень. Остальные вещества на уровень МДА влияния не оказывали. Таким образом, ДМДПС в концентрации 33 мг/л в данной модели проявляет свойства молекулярного антиоксиданта, ингибируя свободно-радикальные процессы на молекулярной стадии - стадии ПОЛ.

Модель II - цельная кровь человека. Показатели ХЛ в модели II - плазма крови в отличии от первой модели, во второй (плазме крови) все вещества слабо воздействовали на параметры ХЛ. Только селенид натрия повышал быструю и максимальную вспышки. Таким образом, все вещества в данной модели не обладают свойствами молекулярных антиоксидантов на радикальной стадии. Содержание МДА в модели II (плазма и эритроциты): ДМДПС не влиял на молекулярную стадию (ПОЛ) во второй модельной системе. Селенид натрия, повышая уровень МДА в плазме, снижал его в эритроцитах. Вещество Х-1 несколько снижало содержание МДА в эритроцитах. Таким образом, ДМДПС в данной модели свойствами молекулярного антиоксиданта не обладает. Для вещества Х-1 подобные свойства выражены не сильно. Селенид натрия обладает двоякой природой, проявляя и те и обратные свойства в зависимости от биосубстрата; причиной такого эффекта могут быть различия в реакции различных компонентов крови, в основе которого может лежать реализация различных защитных механизмов. Результаты исследований свидетельствуют, что ДМДПС в модельной системе липопротеинов желтка куриного яйца в концентрациях 330 и 3,3 мг/л является прооксидантом, стимулируя как радикальную, так и молекулярную стадии СРП. В концентрации 33 мг/л ДМДПС, стимулируя радикальный этап, подавляет молекулярную стадию, проявляя на этом этапе свойства антиоксиданта. В модельной системе цельной крови человека ДМДПС свойств про- или антиоксиданта не проявляет. Na₂Se в модели I в концентрациях 330 и 33 мг/л является прооксидантом на радикальной стадии, но не влияет на молекулярную стадию ПОЛ. То же самое относится к веществу Х-1. В модели II эффекты обоих веществ проявились слабо, что не позволяет четко определить наличие у них свойств про- или антиоксидантов.