Медицина/2. Хирургия

Попов Н.И., Запопадная Л.В., Ковтун Н.В. , Россихин В.В.

Харьковская медицинская академия последипломного образования

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС В РАННИЕ СРОКИ ПОСЛЕ АДЕНОМЭКТОМИИ

Неоднозначна оценка иммунодепрессии в раннем послеоперационном периоде, сопровождающейся увеличением количества клеток, несущих активационный маркеры, включая Т- и В-лимфоциты и NK-клетки. Ряд авторов оценивает это состояние как патологическое состояние, повышающее число инфекционных осложнений. Другие авторы рассматривают иммуннодепрессию как адаптационно компенсаторную реакцию организма. В настоящее время большинство исследователей придерживаются мнения, что если тяжесть оперативного вмешательства не превышает адаптационные возможности организма, то реакция иммунной системы проявляется в усилении резистентости организма, быстром восстановлении гомеостаза и ускоренной регенерации.

Целью исследования было изучение иммунокомпетентного состояния и ее динамики в раннем послеоперационном периоде у больных, которым произведена аденомэктомия.

Материалы и методы. В исследование включены 64 больных с диагнозом ДГПЖ в возрасте от 49 до 72 лет. Все больные были подвергнуты оперативному вмешательству в плановом порядке, произведена одномоментная аденомэктомия. Иммунологическое исследование проводили за 3 дня до оперативного вмешательства и на 7-10 день после операции.

Экспрессию активационных маркеров на поверхности лимфоцитов изучали методом проточной цитофлуориметрии с помощью прибора «FACScan» фирмы «Becton Dickinson» и набора прямых моноклональных антител и изотипических контролей этой же фирмы. Различные комбинации типирующих антител позволили выявлять следующие популяции и субпопуляции лимфоцитов: CD3+ - Т-лимфоциты, CD3+CD4+ - Т-хелперы, CD3+CD8+ - Т-супрессоры, CD4+CD8+ - незрелые Т-лимфоциты, CD3-CD56+ - NK-клетки, CD19+ - В-лимфоциты. Активационные маркеры изучали для следующих субпопуляций клеток: CD3+HLA-DR+ - активированные Т-лимфоциты, CD3-HLA-DR+ - активированные В-лимфоциты и NK-клетки, CD3+CD25+ - Т-лимфоциты с экспрессией рецептора к интерлейкину-2. Кроме того, определяли показатели функциональной активности иммунокомпетентных клеток в тесте реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ), для выявления уровня фактора, угнетающего миграцию лейкоцитов; содержание сывороточных IgG, IgM, IgA; циркулирующие иммунные комплексы с определением доли высоко-, средне- и низкомолекулярных составляющих. Функциональную активность нейтрофилов оценивали с помощью НСТ-теста в спонтанном и стимулированном зимозаном вариантах, фагоцитарную активность - с помощью фагоцитарного показателя и фагоцитарного числа.

Результаты и их обсуждение. Было установлено, что по основным параметрам фенотипического профиля, включая CD 3+, CD 4+, CD 8+ -маркеры, популяционный состав лимфоцитов периферической крови существенно не изменился после операции. Наряду с этим обнаружено достоверное увеличение популяции CD3-CD56+ - клеток, относящихся к NK – клеткам, активность которых связана с регуляцией и высвобождением провоспалительных цитокинов. Регистрировалось также увеличение абсолютного и относительного количества CD-19+ - клеток, характеризующих количество В-лимфоцитов. Было установлено, что у больных после операции повышаются абсолютные и относительные уровни активированных Т-лимфоцитов ( CD3+HLA-DR+), активированных В-лимфоцитов и NK-клеток, (CD3-HLA-DR+) и Т-лимфоцитов с экспрессией рецептора к интерлейкину-2 (CD3+CD25+). Однако, индивидуальный анализ данных показал, что 46% лиц вышеперечисленные изменения активационных маркеров был выше нормы.

Обращает на себя внимание достоверное увеличение реакции торможения миграции лейкоцитов с конконовалином А, что свидетельствует об увеличении продукции лимфоцитами фактора ингибирующего миграцию, который является одним из основных хематтрактантов, регулирующих активность воспалительного процесса. Этому соответствует увеличение уровня спонтанного НСТ-теста, при отсутствии достоверного увеличения этого показателя после стимуляции зимозаном, что может быть расценено как снижение резервных возможностей лейкоцитов. Уровни фагоцитарной активности и фагоцитарного индекса достоверно не изменялись до и после операции. При исследовании концентрации иммуноглобулинов классов М, G, A выраженных изменений не обнаружено, хотя при индивидуальном анализе в 20% случаев отмечалось снижение концентрации иммуноглобулинов А и М при послеоперационном исследовании. Наряду с этим наблюдается достоверное увеличение уровней циркулирующих иммунных комплексов, особенно средне- и низкомолекулярных. По-видимому, это обусловлено снижением резервных возможностей лейкоцитов, осуществляющих элиминацию циркулирующих иммунных комплексов. Косвенно об этом свидетельствует изменение функциональной активности лейкоцитов в спонтанном НСТ-тесте.

При изучении динамики уровней лимфоцитов по данным клинических анализов крови у больных ДГПЖ было установлено, что у 58 больных нормализация этого показателя происходила к пятым суткам послеоперационного периода, у остальных уровни продолжали оставаться сниженными. Дополнительно был проведен по парный корреляционный анализ между относительными уровнями лимфоцитов периферической крови и относительными уровнями активированных Т-лимфоцитов (CD3+HLA-DR+), NK-клеток и Т-лимфоцитов с экспрессией рецептора к интерлейкину-2 (CD3+CD25+). Оказалось, что прослеживается достоверная положительная корреляционная связь только между уровнем лимфоцитов и NK-клетками, активность которых связана с регуляцией и высвобождением провоспалительных цитокинов, которые в свою очередь регулируют уровень воспалительной и регенерационной реакции.

Заключение: Проведенное иммунологическое исследование периферической крови больных с ДГПЖ до и после оперативного вмешательства показало, что при отсутствии выраженных количественных отклонений популяционного состава Т-лимфоцитов, происходит достоверное повышение уровней В-лимфоцитов и NK-клеток, активность которых связана с регуляцией уровня провоспалительных цитокинов. На ряду с этим после операции увеличивается количество клеток, несущих активационные маркеры, при этом эти клетки относятся к разным популяциям включая Т- и В- лимфоциты и NK-клетки. Последний показатель достоверно коррелирует с уровнем стабилизации относительного количества лимфоцитов периферической крови. При исследовании функционального состояния иммунокомпетентных клеток установлено увеличение реакции торможения миграции лейкоцитов, повышение уровня в спонтанном НСТ-тесте и увеличении количества циркулирующих иммунных комплексов.

Выявленные изменения могут быть обусловлены оперативным вмешательством, которое является сильным стрессовым воздействием и отражается на иммунной системе. Развитие послеоперационных осложнений зависит от интенсивности реакции иммунного гомеостаза. Результаты проведенных исследований позволяют надеяться, что использование лекарственных препаратов, регулирующих уровень провоспалительных цитокинов, позволит компенсировать развивающееся вследствие оперативного вмешательства отклонения.