Мельник В.М., Тривайло М.С., Карачун
В.В.
Національний технічний
університет України «КПІ»
КУЛЬТИВУВАННЯ КЛІТИН В РІДИННОМУ
СЕРЕДОВИЩІ
Пропонуєма конструкція відноситься до біотехнології. Доцільне використання
окресленне культивуванням клітин в рідинних середовищах при виготовленні
біологічно-активних речовин і вакцин.
Відомий апарат для культивування (АК) клітин, який містить корпус з
технологічними патрубками і розміщений по осі корпусу пустотілий вал
імпульсного привода з втулкою, до якої приєднаний перемішуючий елемент у формі
чотирьохланцюгового шарніра з лопатками на кінцях, з'єднаний з порожниною і
рухомою втулкою шарніра фільтруючий елемент, а також аератор (див, наприклад,
А. с. СССР № 1633814, С12МЗ/00, 1995). Недолік
цього АК полягає в низькій продуктивності, що обумовлено недостатньою інтенсивністю
перемішування клітин при невеликих швидкостях обертання, що зумовлює обмежену
кількість кисню і уповільнює їх розвиток, а, отже, знижує продуктивність, і
навпаки, при збільшенні числа обертів вала - перемішуючий елемент руйнує їх
оболонки та закручує робочу рідину, що, в свою чергу, також знижує продуктивність.
Крім того, відомий АК має складну конструкцію, що слугує іншою його вадою.
Відомий також АК, який містить вертикально встановлений циліндричний корпус
з технологічними патрубками, розміщений вздовж осі корпусу вал з перемішуючими
лопатками, аератор, привод, а також, розміщені в діаметральній площині корпусу
гальмуючі перегородки, які розташовані прилегло до корпусу, ребрами меншої
грані ( А. с. СССР №1555353, С12М1/04, 1990).
Цей АК є найбільш близьким до пропонуємої конструкції за технічною суттю та
досягаємим ефектом. Він простіший від попереднього та суттєво зменшує
закручування робочої рідини і
пошкодження клітин. Разом з тим, його недолік полягає у відносно низькій
продуктивності внаслідок пасивного перемішування (масообміну) робочої рідини.
Зазначений недолік породжений неоптимальним розташуванням перемішуючих
лопаток в діаметральній площині та їх приляганням до корпусу ребрами вузької
грані, що зменшує число напрямків руху робочої рідини при перемішуванні.
В основу пропонуємої моделі поставлена задача підвищення продуктивності
шляхом збільшення числа напрямків руху робочої рідини при її перемішуванні. [1]
Поставлена задача вирішується тим, що в АК, який містить циліндричний
корпус з технологічними патрубками, розміщений вздовж осі корпусу вал з
перемішуючими лопатками, привод, аератор, а також розташовані прилегло до
корпусу (з внутрішньої сторони) гальмуючі перегородки, згідно вивчаємої моделі,
новим є те, що кожна гальмуюча перегородка розташована під прямим кутом до
діаметра корпусу і розміщена з можливістю прилягання до нього протилежними
ребрами більшої грані.
Вказані відмітні ознаки забезпечують при перемішуванні робочої рідини
її додаткове переміщення (рух) по
висоті, що відсутнє в найближчому аналозі і інтенсифікує процес перемішування, в
першу чергу змішування придонних та поверхневих її шарів.
Інтенсифікація процесу перемішування підвищує рівномірність розподілу
живильних речовин (і клітин) в об’ємі робочої рідини, а це прискорює ріст
клітин і приводить до зростання продуктивності.
На рис. 1
схематично зображено пропонуєму конструкцію АК; на рис. 2 – переріз А-А на рис.
1.
АК
містить циліндричний корпус 1 з патрубком 2 для введення живильної рідини і
посівного матеріалу, патрубком 3 з аератором 4, патрубком 5 для видалення
культуральної рідини і патрубком 6 для виведення відпрацьованого газу. Вздовж
осі корпусу 1 розміщений приєднаний до приводу (мотор – редуктора) 7 вал 8 з
перемішуючими лопатками 9. В порожнині корпусу 1 розташовані також гальмуючі
перегородки 10 у вигляді плоских пластин висотою Н і шириною В (рис. 2).
Перегородки 10 розташовані під прямим кутом α
до діаметра Д корпусу 1 (тобто в площинах його хорд) і розміщені з можливістю
прилягання до нього протилежними ребрами «а»,
«в» більшої грані, тобто грані
розмірами НхВ.
Розташування
перегородок 10 під прямим кутом до діаметра D корпусу 1 з можливістю прилягання їх до корпусу ребрами
більшої грані, приводить до утворення ними зі стінкою корпусу замкнутих
пристінних проміжків 11, що відсутнє в найближчому аналозі. Це незмінно
викликає додатковий рух робочої рідини при її перемішуванні.
Працює
АК наступним чином. В попередньо простерилізований корпус 1 через патрубок 2
вводять живильну рідину і посівний матеріал (робоча рідина). Після цього
вмикають привод 7, внаслідок чого перемішуючі лопатки 9 приводять в обертовий
рух робочу рідину 12, здійснюючи її переміщення в коловому напрямку 13 (рис.
2), а, отже, реалізують часткове перемішування. Одночасно з цим, в аератор 4
подають стиснений газ (повітря), який у вигляді численних бульбашок 14
надходить в центральну частину робочої рідини 12 і утворює з нею
рідинноповітряну суміш, яка набагато легша від робочої рідини, що знаходиться в
утворених перегородками 10 проміжках 11. Різна щільність (питома вага) робочої
рідини в центральній частині і проміжках 11 породжує градієнт тиску і, тим
самим, викликає додатковий рух робочої рідини вздовж висоти корпусу у вигляді
висотної циркуляції 15 навколо перегородок 10. Цей чинник приводить до більш активного
змішування між собою придонних та поверхневих шарів робочої рідини.
Оскільки
при перемішуванні робоча рідина рухається в двох напрямках - коловому і
осьовому - замість одного (колового) в найближчому аналозі, то інтенсивність
масообміну росте, а це прискорює розвиток клітин і слугує зростанню
продуктивності.
По
закінченні процеса культивування, зупиняють привод 7, а готовий для подальшого
використання продукт зливають через патрубок 5.
Література
1. В.М. Мельник,
М.С. Тривайло, В.В. Карачун, О.Я. Ковалець. Ізоляція імпедансних систем
приладів. –К.: «Корнійчук», 2009. – 104с.