Биологические науки/8. Физиология человека и животных
Малиновская
С.Л. *, Хомутов А.Е., Малиновский Д.С.
*Нижегородская
государственная медицинская академия,
Нижегородский государственный
университет им. Н.И. Лобачевского
Нижегородская государственная медицинская
академия
г. Нижний Новгород, Россия
Влияние гепарина на
изменения показателей красной
крови, индуцированные
зоотоксинами
По
немногочисленным данным литературы известно, что при внутривенном введении
гепарина кроликам в дозе 15 – 30 МЕ/кг независимо от дозы препарата содержание
эритроцитов, уровень гемоглобина и гематокрит находились в пределах
физиологических колебаний на протяжении 10 – 12 часов после введения. Значительные колебания
отмечались в количестве ретикулоцитов. Между 15 – 60 мин, а также в течение 2-х
суток наблюдались ступенчатые выбросы ретикулоцитов с превышением нижней
границы нормы физиологических колебаний в 2,7 – 3,6 раза [1].
При введении яда
щитомордника, гюрзы и эфы в дозе 1/5 ЛД100 количество эритроцитов
достоверно снижается относительно контроля [2,3], а при инъекции пчелиного яда и яда кобры количество эритроцитов в
периферической крови достоверно увеличивается [4,5,6].
Сведений о
сочетанном действии гепарина и зоотоксинов на показатели красной крови в
доступной нам литературе не обнаружено, в связи с чем целью настоящего
исследования явилось изучение изменений эритроцитарного и ретикулоцитарного
пула, уровня гемоглобина и гематокрита при введении зоотоксинов, гепарина и
смеси гепарин-яд.
Работа была
выполнена на 110 лабораторных крысах-самцах, содержащихся в стандартных
условиях вивария. Введение пчелиного яда, ядов эфы гюрзы кобры и щитомордника
производилось внутрибрюшинно в дозе 0.5 ЛД50. Гепарин в дозе 50
МЕ/кг и смесь гепарин-яд в весовом соотношении 0.5:1 соответственно также
вводили внутрибрюшинно. Полученные данные были подвергнуты статистической
обработке методом парных сравнений по критерию Стьюдента. Различия между
контрольными и экспериментальными группами считались статистически значимыми
при р≤0.05.
Введение гепарина
в тестовой дозе сопровождалось незначительным увеличением количества
эритроцитов относительно контрольных величин (табл. 1).
Таблица 1
Количественная оценка эритроцитов при
введении зоотоксинов
и смеси гепарин-яд
|
Наименование яда |
Количество эритроцитов (1х1012/л) |
|||
|
Физ. р-р |
Яд |
Гепарин |
Яд+гепарин |
|
|
Яд пчелы (5 мг/кг) |
7.8±0.3 |
8.8±0.1 |
8.0±0.2 |
8.6±0.3 |
|
Яд эфы (3 мг/кг) |
7.8±0.3 |
8.3±0.3 |
8.0±0.2 |
8.6±0.2 |
|
Яд гюрзы (3 мг/кг) |
7.8±0.3 |
8.1±0.4 |
8.0±0.2 |
7.9±0.1 |
|
Яд кобры (1 мг/кг) |
7.8±0.3 |
9.4±0.1(* |
8.0±0.2 |
8.2±0.4 |
|
Яд щитомордника (4 мг/кг) |
7.8±0.3 |
10.6±0.1(* |
8.0±0.2 |
10.2±0.3(* |
*) - различия
между контрольными и экспериментальными группами
статистически значимы
(р≤0.05)
Достоверное
увеличение количества эритроцитов регистрировалось при введении яда кобры и яда
щитомордника и составляло 9.4±0.1
и 10.6±0.1·1012/л соответственно. При инъекции ядов пчелы, гюрзы и
эфы наблюдалось недостоверное увеличение эритроцитарного пула (табл. 1).
При введении смеси гепарин-яд
эритроцитоз фиксировался только при применении яда щитомордника (10,2±0,3·1012/л),
в остальных случаях количество эритроцитов достоверно не отличалось от контроля
(табл. 1).
Наиболее
вариабельным показателем красной крови при введении зоотоксинов является
количество ретикулоцитов. Следует отметить, что при введении всех исследованных
зоотоксинов количество ретикулоцитов увеличивается. Однако это увеличение для
каждого токсина имеет специфический характер. Так, максимальный ретикулоцитоз
наблюдается при введении яда щитомордника, а минимальный – при инъекции яда эфы
(рис. 1).
Рис. 1. Количественная оценка ретикулоцитов при
введении зоотоксинов
и смеси гепарин-яд.
Яд пчелы (5 мг/кг); яд эфы (3 мг/кг);
яд гюрзы (3 мг/кг);
яд кобры (1 мг/кг);
яд щитомордника (4 мг/кг).
*) - различия между контрольной и экспериментальными
группами
статистически значимы (р<0.05).
При введении смеси гепарин-яд во всех случаях,
кроме яда щитомордника, происходит
снижение количества ретикулоцитов относительно группы животных, которым вводили
яд. При инъекции яда щитомордника количество ретикулоцитов достоверно выше, чем
в контроле и соответствует 118.3±4.6 мг %, а при
введении смеси с гепарином в соотношении 1:05 этот показатель увеличивается до
128.1±8.4 мг % (рис. 1).
Соответственно увеличению количества
эритроцитов и ретикулоцитов при введении зоотоксинов увеличивается и уровень
гемоглобина в периферической крови. Гипергемоглобинемия наблюдается при
введении всех исследуемых ядов, причём максимальный уровень гемоглобина (200±1.4 г/л) регистрируется при введении яда щитомордника
(рис. 2).
Рис. 2. Количественная оценка уровня гемоглобина при
введении зоотоксинов и смеси гепарин-яд.
Яд пчелы (5 мг/кг); яд эфы (3 мг/кг); яд гюрзы (3 мг/кг);
яд кобры (1 мг/кг); яд
щитомордника (4 мг/кг).
*
- различия между контрольной и экспериментальными группами
статистически значимы (р<0.05).
Характерной особенностью
экзогенного гепарина является тот факт, что при его введении уровень
гемоглобина достоверно снижается со 165±1.1 г/л в контроле до 87.5±14.6 г/л в эксперименте (рис. 2). Этот эффект, по
всей видимости, связан с тем, что гепарин может вступать во взаимодействие с
белками крови [7], в частности с гемоглобином с образованием комплекса, в
котором специфика реагирующих друг с другом веществ нивелируется. При
совместном применении гепарина и зоотоксинов уровень гемоглобина снижается до
параметров физиологической нормы, и только при инъекции смеси яд щитомордника –
гепарин (1:0.5) уровень гемоглобина увеличивается (211±9.1
г/л) как по сравнению с контролем (165±1.1г/л),
так и по сравнению с группой животных, которым вводился только яд щитомордника
(200±1.4 г/л) (рис. 2).
Введение зоотоксинов в
исследуемых дозах сопровождается достоверным увеличением показателей гематокрита
(табл. 2). Повышение гематокрита связано с увеличением количества эритроцитов и
ретикулоцитов, особенно заметное при применении яда щитомордника.
Таблица 2
Изменение показателей гематокрита при
введении
зоотоксинов и смеси гепарин-яд
|
Наименование яда |
Показатели гематокрита (%) |
|||
|
Физ. р-р |
Яд |
Гепарин |
Яд+гепарин |
|
|
Яд пчелы (5
мг/кг) |
46±0.4 |
52±0.5(* |
48±0.6 |
47±1.3 |
|
Яд эфы (3
мг/кг) |
46±0.4 |
50±1.1(* |
48±0.6 |
43±0.9 |
|
Яд гюрзы (3
мг/кг) |
46±0.4 |
49±0.6 |
48±0.6 |
45±1.0 |
|
Яд кобры (1
мг/кг) |
46±0.4 |
51±0.9(* |
48±0.6 |
44±0.6 |
|
Яд щитомордника (4 мг/кг) |
46±0.4 |
51±08(* |
48±0.6 |
52±1.2(* |
*) - различия между
контрольными и экспериментальными группами
статистически значимы (р≤005)
При совместном применении
гепарина с ядом в виде смеси показатели гематокрита возвращаются к контрольным
величинам, кроме группы животных, которым вводился яд щитомордника в смеси с
гепарином (табл. 2).
Таким образом, исследуемые
зоотоксины увеличивают количество эритроцитов и ретикулоцитов, повышают уровень
гемоглобина и показатели гематокрита. Эти изменения, видимо, связаны с тем, что
введение зоотоксинов сопровождается стресс-реакцией, а увеличение показателей
красной крови является защитно-компенсаторной реакцией. Гепарин в смеси с
зоотоксинами в большинстве случаев снижает показатели красной крови до
физиологической нормы. Исключением является смесь яд щитомордника-гепарин, при
введении которой показатели увеличиваются. Этот феномен связан, возможно, с
тем, что все зоотоксины, кроме яда щитомордника, вступают во взаимодействие с
гепарином [3], при котором яды частично или полностью теряют свои токсические
свойства.
Литература
1. Мямлина Г.А., Соловьева
И.И. Изменение морфологического состава крови и ее свертывающей системы после
введения гепарина // Гепарин. Физиология, биохимия, фармакология и клиническое
применение. Тезисы III Всесоюзной конференции. М.: Медицина, 1969. – С.
35-38.
2. Глазунова Г.А., Григорьев Г.П., Баркаган З.С. и др. Динамика количественного и качественного изменения эритроцитов в процессе
развития токсогенных синдромов диссеминированного внутрисосудистого свёртывания
крови // Гематология и трансфузиология. 1988. Т. 33, № 11. – С. 38-41.
3. Хомутов А.Е., Гиноян Р.В., Ягин В.В. Термоадаптивные
свойства зоотоксинов. – Н. Новгород: Изд. ННГУ, 2005. – 225с.
4. Хомутов А.Е., Пурсанов К.А., Калашникова Л.М.
Пчелы, пчелиный яд, апитоксинотерапия. – Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2006. –
380с.
5. Дерюгина А.В., Захарова О.А., Крылов В.Н. Влияние пчелиного яда на адаптивные
реакции эритроцитов при иммобилизационном стрессе // Вестник Нижегородского
университета им. Н.И. Лобачевского, 2010. № 2. Часть 2. – С. 627-630.
6. Хомутов А.Е., Пурсанов К.А. Биологические и
клинические основы апитерапии. Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2011. – 400 с.
7. Ляпина Л.А., Житникова Е.С., Бонева Ж.С. Исследование образования комплексов
гепарина с белками плазмы крови на аналитической ультрацентрифуге // Научные
доклады высшей школы. Биологические науки, 1982 № 3. С. 25-28.