Профессор, д. х. н. Алыков Н. М., Жукова О.С., Бубнова В. В., Бубнова Н. В., Дейкина Е.В..

Астраханский государственный университет, Россия

Новая методика определения сульфаниламидных препаратов

Задачей исследования явилось экспериментальное изучение образования сульфаниламидными препаратами азосоединений с хромотроповой кислотой, а так же разработка сорбционно-фотометрического метода определения сульфаниламидов в различных объектах.

Образование соли диазония

К сульфаниламидным препаратам относится группа соединений с общей формулой , где один из атомов водорода аминогруппы, находящейся в положении 4, может быть также замещен различными радикалами, [1].

Сульфамиды в солянокислой среде образуют соли диазония, в образовании которых участвует нитрит натрия

Сульфамид Соль диазония

В присутствии хромотроповой кислоты и соли диазония образуется азосоединение, окрашенное в яркий алый цвет (λ=530 нм), [2].

Выполнение определения. Навеску сульфамидного препарата 0,01 г, взятого после измельчения таблетки, растворяют  в HCl, доливают водой до 10. Отдельно приготавливают раствор нитрита натрия (0,01 г в 10 см³ воды) и хромотроповой кислоты (0,03 г в 10 см³ воды  + 2 кристаллика Na₂CO₃·10 H₂O). Мелко дробят лед, помещают в стакан емкостью 100 см³ 20 г льда, вносят раствор сульфамида и нитрита натрия. Через 1 мин добавляют хромотроповую кислоту и доводят объем до 50 см³ водой. Формируется азосоединение, окрашивающее раствор в алый цвет. Таким образом приготавливают растворы всех производных сульфамидов, [3].

Градуировочные графики. В серию пробирок вносят разбавленный в 100 раз исходный раствор: 0; 0,05; 0,1; 0,20; 0,40;  0,60; 1,0; 2,0; 5,0 см³ и доводят объем  до 10 см³ водой и измеряют оптические плотности растворов в кювете толщиной 1 см относительно воды. Градуировочные графики для  определения сульфамидов в индивидуальных препаратах приведены на рис. 1.

Рис. 1. Зависимость оптической плотности от концентрации растворов сульфамидов в индивидуальных препаратах.

Результаты определения индивидуальных сульфамидных препаратов  в их растворах приведены в таблице 1.

Таблица  1.  Метрологические характеристики методики определения сульфамидов в индивидуальных препаратах фотометрическим методом, n=6. P=0,95; t_p=2,57.

Препарат

Внесено в воду, мг/дм³

Найдено, мг/дм³

Данным методом

По методике [10]

Стрептоцид

0,01

0,10

1,00

0,01±0,005

0,10±0,01

1,00±0,15

0,01±0,01

0,10±0,05

1,00±0,25

Норсульфазол

0,01

0,10

1,00

0,01±0,005

0,10±0,01

1,00±0,10

0,01±0,01

0,10±0,05

1,00±0,30

Этазол

0,01

0,10

1,00

0,01±0,005

0,10±0,01

1,00±0,15

0,01±0,01

0,10±0,05

1,00±0,30

Сульфадимезин

0,01

0,10

1,00

0,01±0,005

0,10±0,01

1,00±0,15

0,01±0,01

0,10±0,05

1,00±0,30

Как видно из таблицы 1, разработанная методика определения сульфаниламидов более чувствительна и обладает высокими метрологическими характеристиками, чем взятый для сравнения прототип.

Тонкослойная хроматография соединений. Образующиеся соединения хорошо растворимы в воде и водно-этанольных смесях до содержания этанола на уровне 60 %.

Соединения хорошо адсорбируются силикагелями (например, на силикагеле КСМГ), на крахмале и целлюлозе, что обеспечивает возможность разделения их с помощью хроматографии, в том числе и тонкослойной хроматографии (ТСХ). Было проверено ТСХ разделение полученных азосоединений на пластинках Sorbfil (ТУ 26-11-17-89) на основе алюминиевой фольги ПТСХ-АВ-В и силикагеле КСМГ.

Выполнение разделения. На пластинку через 1 см на линии старта вносят по 0,03 мл (1 капля) 10^-3 М раствора каждого из азопроизводных сульфамидов. Пластинку опускают в стакан, на дно которого на высоту 0,5 см налита смесь этанол : уксусная кислота : вода (50:1:49). Стакан накрывают колпаком. После того как подвижная фаза достигнет верхней отметки пластины (1 см от верхнего края), пластинку вынимают, подсушивают в токе воздуха (вентилятор) и измеряют расстояния, пройденные отдельными компонентами. Эти расстояния достаточно близки, однако они различаются. Рассчитывают коэффициент разделения R_f

где h_x – расстояние, пройденное подвижной фазой. Результаты разделения приведены в таблице 2.

Таблица 2. Хроматографические характеристики (R_f) азопроизводных сульфамидных препаратов.

Производные сульфамидов	R_f	Цвет пятна	Смесь производных	R_f
Стрептоцид	0,65	алый	стрептоцид, норсульфазол этазол, сульфадимазин пятна хорошо разделяются	0,65
Норсульфазол	0,45	алый		0,45
Этазол	0,55	алый		0,55
Сульфадимазин	0,60			0,60

Таким образом, с использованием тонкослойной хроматографии разработана методика качественной идентификации и количественного определения сульфамидных препаратов.

Литература:

1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: ООО «Новая волна». В 2 книгах. Книга 2. - 608 с..

2. Алыков Н.М., Дейкина Е.В. Способ количественного определения сульфамидных препаратов в лекарственных формах. Пат. РФ № 2419091. Заяв. 30.07.2009г., опубликовано 20.05.2011г..

3. Органическая химия. Нейланд О.Я., Учебник для хим. спец. вузов., М.: Высш. шк., 1990. - 751с..