Медицина/ 7. Клиническая медицина

Ижанова А. К.

Казахский национальный медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова, г. Алматы

Особенности местного иммунитета слизистой оболочки желудка у больных старшей возрастной группы

Мукозальный иммунитет является сложной системой, включающей доиммунные механизмы защиты, а также структурированную и диффузную лимфоидную ткань, клетки эпителия, дендритные клетки, макрофаги, нейтрофилы [1].

Одним из важных факторов, влияющих на мукозальный иммунитет, являются микроорганизмы, населяющие слизистые оболочки (СО) [2]. Защитные механизмы СО включают в себя много факторов и являются продуктом совместной деятельности макроорганизма и микрофлоры. Мукозальные эпителиоциты обладают значительным эффекторным потенциалом в реакциях воспаления и иммунитета, реализия его в ответ на стимулирующее воздействие экзогенной (микроорганизмы, аллергены, поллютанты) и эндогенной (цитокины и др.) природы [3]. Список цитокинов, секретируемых этими клетками, включает интерлейкины (ИЛ) 1α, 1β, 6, 7, 10, 15, раИЛ-1, фактор некроза опухоли ( ФНО –α, ГМ-КСФ, фактор роста нервов, трансформирующий фактор роста и СС хемокины ( МСР-1, МДС, RANTES) [4]. При активации мукозальные эпителиоциты усиливают секрецию цитокинов, эйкозаноидов (аукоидов), оксида азота, эндотелинов, дифенсинов, ингибиторов провоспалительных агентов, цитокиновых рецепторов, молекул главного комплекса гистосовместимости и межклеточных взаимодействий [5].

Слизистая оболочка ЖКТ подвергается непрерывному воздействию огромного количества провоспалительных и иммуногенных стимулов, которые исходят от продуктов питания и нормальной микрофлоры. Несмотря на это, интестинальное воспаление имеет обычно физиологический характер, не выходя за рамки компенсаторных реакций. Нечто подобное происходит при колонизации желудка Helicobacter pylori- нормальными (для данного биотопа), но потенциально опасными комменсалами. В большинстве случаев это вызывает субклиническое воспаление («хронический гастрит»), которое иногда переходит в патологию (пептические язвы, злокачественная трансформация) [4]. По литературным данным частота инфицированности Н. pylori пожилых людей составляет 40-60% у лиц с заболеваниями верхних отделов пищеварительного тракта, и - свыше 70% при дуоденальной патологии [6,7]. Средний уровень инфицированности Н. pylori в России среди взрослого населения составляет более 80% [8,9].

Клиническими проявлениями иммунного дисбаланса на слизистых оболочках является персистенция воспалительных процессов, быстрый переход в хроническое состояние, частые обострения, малая эффективность традиционной противовоспалительной терапии, развитие аллергических и псевдоаллергических реакций [10].

Состояние СО нередко предопределяет исход воспалительного процесса- выздоровление или переход в хроническую стадию- поэтому мероприятия по их адекватной защите является одной из актуальных задач современной клинической иммунологии.

Цель исследования: изучение субпопуляционного профиля лимфоцитов слизистой оболочки желудка у больных пожилого и старческого возраста с язвенной болезнью желудка и хроническим гастритом.

Материалы и методы: Материалом для исследования служили 60 биоптатов слизистой оболочки желудка (СОЖ), полученные при фиброгастродуоденоскопии (ФГДС), проводимой на базе КазНИИОР г. Алматы. Группу исследования составили 30 больных, средний возраст которых составил 72,96 ±5,96 лет, с хронической воспалительной патологией желудка (15 больных язвенной болезнью желудка и 15 больных хроническим гастритом). В дальнейшем пожилых больных с патологией желудка разделили на группу 1- биоптаты получали из здорового участка СОЖ и группу 2 – из пораженного. В качестве контроля использовали биоптаты СОЖ, полученные у 30 практически здоровых молодых лиц в возрасте 30,8 ± 8,05 лет. Все обследованные группы контроля не имели клинических, эндоскопических и морфологических признаков патологии гастродуоденальной зоны и проявлений вторичной иммунологической недостаточности.

Выделение иммунокомпетентных клеток из СОЖ проводили безферментативным способом. Фрагменты СОЖ помещали в контейнер «Medicon» (Becton Dickenson/США), добавляли фосфатный буфер и измельчали в гомогенизаторе «Medimachine» (Becton Dickenson/США) в течение 3 минут. Полученную клеточную суспензию центрифугировали 30 мин в градиенте плотности фиколл-верографин (p =1,078). Субпопуляционный анализ лимфоцитов биоптатов проводили на проточном цитометре «FacsCalibur» (Becton Dickenson/США) с применением панели моноклональных антител к поверхностным антигенам лимфоцитов (НПО «Сорбент»/Москва, РФ) с двойной меткой (FITS и фикоэритрин) с определением 12 параметров популяционного профиля лимфоцитов.

Результаты: Сопоставление параметров клеточного звена иммунитета СОЖ у больных пожилого возраста с патологией ЖКТ из здорового участка слизистой и патологического достоверно значимых изменений не выявило (см. таблицу 1). Сравнение аналогичных показателей группы контроля - молодых и результатов, полученных из здоровых участков СОЖ пожилых больных ЖКТ, позволило установить статистически значимое выраженное снижение показателей CD56+ как за счет CD56+CD16- (1,7+0,72, Р<0,01), так и CD56+CD16+ (42,7+5,89, Р<0,05), CD4-CD25+ (5,2+0,66, Р<0,01), HLA-DR+ (3,1+ 1,79, Р<0,01).

Анализ показателей группы 2 выявил аналогичное статистически значимое снижение CD4-CD25+ (5,4+1,36, Р<0,05), HLA-DR+ (3,0+ 1,08, Р<0,01), CD56+CD16- (3,0+1,87, Р<0,05). В отличие от результатов группы 1 снижение CD56+CD16+ в биоптатах, полученных из патологических участков СОЖ пожилых больных, не достигли статистически значимых величин.

Таблица 1.- Сравнительная характеристика относительных показателей клеточного иммунитета СОЖ среди исследуемых групп (%)

Показатели	Контроль-молодые			Пожилые больные ЖКТ N=30						Р контроль/ Р группа 1	Р контроль/ Р группа 2
	N=30			Группа 1 (норм. СОЖ)			Группа 2 (патол. СОЖ)
	M	+	M	M	+	m	M	+	M
CD3+	8,0	+	1,66	17,5	+	6,20	20,2	+	6,42
CD4+	5,9	+	1,29	13,4	+	4,58	14,8	+	4,84
CD4+CD25-	5,6	+	1,20	10,8	+	3,07	12,8	+	3,96
CD4+CD25+	0,4	+	0,28	2,6	+	1,90	2,0	+	1,25
CD8+	39,7	+	4,68	33,1	+	3,29	32,2	+	4,22
CD8+CD4+	2,6	+	0,98	3,7	+	0,97	2,6	+	0,84
CD56+CD16+	63,0	+	6,89	42,7	+	5,89	43,9	+	7,75	<0,05
CD56+CD16-	17,7	+	4,73	1,7	+	0,72	3,0	+	1,87	<0,01	<0,05
CD8+CD16+	16,5	+	2,53	11,5	+	1,32	12,1	+	2,17
CD4-CD25+	18,7	+	4,40	5,2	+	0,66	5,4	+	1,36	<0,01	<0,05
HLA-DR+	22,0	+	4,51	3,1	+	1,79	3,0	+	1,08	<0,01	<0,01
CD20+	10,9	+	3,28	7,8	+	1,27	8,6	+	2,43

У пожилых больных с хроническим гастритом и язвенной болезнью желудка показатели субпопуляционного профиля лимфоцитов слизистой оболочки желудка, изученные на здоровом и патологическом участке, выявили однотипные изменения: снижение показателей CD56+CD16-, CD4-CD25+, HLA-DR+. Разница наблюдалась лишь в достоверном снижении CD56+ за счет CD56+CD16+ в биоптатах, полученных из здоровых участков СОЖ пожилых больных с патологией желудка.

Выводы: У пожилых больных с патологией желудка на уровне мукозальной иммунной подсистемы наблюдается снижение обеих субпопуляций натуральных киллеров и экспрессии активационных маркеров (CD25+ и HLA-DR+) при нормальном содержании Т и В лимфоцитов.

Литература.

1. Хорошилова Н.В. Лечебное и иммуномодулирующее действие пробиотиков// Иммунология.- 2003.- N 6.-С. 52-59.

2. Blum S., Schiffrin E. J. Intestinal microflora and homeostasis of the mucosal immune response: implication for probiotic bacteria? // Curr. Issues Intest. Microbiol.- 2003.- 4(2).- Р. 53-60.

3. Хаитов М. Р. Роль респираторных вирусов в патогенезе бронхиальной астмы //Иммунология. 2003.-№ 1.- С. 58-65.

4. Маянский А. Н., Маянская И. В. Реактивность и медиаторные функции интестинальных эпителиоцитов в системе мукозального гомеостаза //Иммунология. 2004.-№ 3.- С.185-191.

5. Berkes J, Viswanathan V. K., Savrovic S. D. Intestinal epithelial responses to enteric pathogens: effects on tight junction barrier, ion transport and inflammation // Gut.- 2003.- Vol. 52.-P.439-451.

6. Pilotto A., Salles N. Helicobacter pylori infection in geriartrics // Helicobacter . -2002.- Vol. 7 (Suppl 1).- P. 56-62.

7. Pilotto A., Malfertbeiner P. Review article: an approach to Helicobacter pylori infection in the elderly // Aliment Pharmacol Ther. -2002.- № 4.- P. 683-691.

8. Решетников О. В., Курилович С. А., Кротов С. А. Распространенность атрофического гастрита в различных популяциях Сибири по данным серологического исследования //Клиническая медицина.- 2008.-№ 7.- С. 35-38.

9. Цуканов В. В. Клинико-эпидемиологические аспекты Helicobacter pylori//Экспериментальная клиническая гастроэнтерология.- 2006.-№ 1.- С. 24-27.

10. Wiedermann U. Mucosal immunity – mucosal tolerance. A strategy for treatment of allergic diseases //Chem. Immunol. Allergy.-2003.- 82.- Р. 1-24.