Биологические науки/ 6. Микробиология
к.х.н.
Таутова Е.Н., к.х.н. Хамитова А.С., Гулевская Е.Г.
Кокшетауский государственный
университет им. Ш. Уалиханова,
Казахстан
Определение афлатоксинов в продуктах
животного происхождения
Актуальность проблемы безопасности
продуктов питания с каждым годом возрастает, поскольку именно обеспечение
безопасности продовольственного сырья и продуктов питания является одним из
основных факторов, определяющих здоровье людей и сохранение генофонда.
В последнее время особое место занимает
решение проблемы афлатоксикозов – специфических заболеваний, развивающихся в
результате попадания в организм человека и животных, содержащих токсические
метаболиты микроскопических патогенных грибов (афлатоксинов). Влияние их не
ограничивается снижением качества потребляемого корма, здоровья и
продуктивности животных, многие афлатоксины переходят в продукты
животноводства, обладают мутагенными и канцерогенными свойствами, нарушают
психическую деятельность и поведение человека.
Афлатоксины – представляют собой одну из наиболее опасных групп микотоксинов,
обладающих сильными канцерогенными свойствами. Афлатоксины обнаруживают в
различных продуктах пищевого предназначения – в зерне злаковых культур, в
различных орехах, специях, какао, кофе, некоторых овощах и фруктах, в семенах
масличных растений, в молоке, мясе, яйцах. Семейство афлатоксинов включает
четыре основных представителя (афлатоксины В1, В2, G1, G2), а также производные
или метаболиты основной группы (М1, М2, В2а, G2a, GM1, Р1, Q1 и др.). Продуцентами афлатоксинов являются некоторые
штаммы 2 видов микроскопических грибов: Aspergillus flavus и Aspergillus parasiticus. По своей
химической структуре афлатоксины являются фурокумаринами.
Провоцируя острую интоксикацию даже при
употреблении низких доз, афлатоксины специфически поражают печень и почки,
слизистые оболочки пищевода и кишечника, мозг, ткани половых органов. Особенно
опасны афлатоксины для детей, резко угнетая их рост, физическое и умственное
развитие, снижая устойчивость к инфекционным заболеваниям. Понемногу
накапливаясь в организме, афлатоксины могут вызывать рак печени.
Афлатоксины характеризуются
фитотоксическими свойствами, вызывают альбинизм у растений. Корма, пораженные
токсинообразующими штаммами Aspergillus flavus, не обезвреживаются запариванием
и не инактивируются кислотами и щелочами.
Установление
высокой токсичности и канцерогенности афлатоксинов и обнаружение их в
значительных количествах в основных пищевых продуктах во всем мире привело к
необходимости разработки эффективных методов детоксикации сырья, пищевых продуктов
и кормов.
Для определения остаточного количества
афлатоксинов используют следующие методы:
1. Метод высокоэффективного жидкостного
хроматографа (ВЭЖХ).
2. Метод тонкослойной хроматографии.
Методы высокоэффективной жидкостной
хроматографии (ВЭЖХ) в области исследования афлатоксинов главным образом
используются для заключительного отделения матричных соединений и обнаружения
интересующего анализируемого вещества.
В настоящее время методы ВЭЖХ широко распространены
из-за их превосходящих характеристик и надежности по сравнению с тонкослойной
хроматографией. Методы ВЭЖХ были разработаны для большинства основных
микотоксинов в зерновых культурах и другой сельскохозяйственной продукции.
Метод ВЭЖХ основан на разделении
анализируемого экстракта в неподвижной фазе хроматографической колонки (рисунок
1) и дальнейшей их идентификации и количественном определении с помощью
специальных детекторов. Наиболее распространенными детекторами для анализа
афлатоксинов в настоящее время являются ультрафиолетовый и флюоресцентный.
Пределы чувствительности методов ВЭЖХ с применением данных детекторов могут
доходить до 1 мкг/кг образца.
Рисунок 1. Жидкостная хроматография.
Тонкослойная хроматография является
хроматографической методикой, применяемой для разделения, оценки чистоты и
идентификации органических соединений. Она основана на применении пластин с
нанесенной неподвижной фазой и подвижной фазы (растворитель) (рисунок 2).
Рисунок 2. Тонкослойная хроматография.
Идентификация анализируемого вещества
проводится при одновременном внесении на пластину экстракта образца и
стандартных растворов с известной концентрацией. Различные соединения в смеси
продвигаются по пластине с различной скоростью вследствие различия в
закономерностях их разделения между мобильной жидкой и неподвижной фазами.
На этом принципе основано разделение
веществ в смеси экстракта. Флуоресцирующие вещества выявляют в УФ-свете, все
остальные – с помощью специфических реагентов.
Таким образом, в связи с вышеизложенным, вопросы контроля за
загрязнением пищевых продуктов
и кормов микотоксинами остаются актуальными и решаются не только в рамках
отдельных государств, но и на международном
уровне.
В системе
организации контроля за загрязнением продовольственного сырья и пищевых продуктов выделяют два уровня: инспектирование
и мониторинг, которые включают регулярные количественные анализы
продовольственного сырья и пищевых продуктов.
Особое значение имеет контроль за загрязнением микотоксинами при характеристике
качества сырья и продуктов, импортируемых из других стран. С целью профилактики
алиментарных токсикозов основное внимание следует уделять зерновым культурам.
Литература:
1.
Нечаев А.П. Пищевая
химия. СПб.: ГИОРД, 2003 – 640 с.
2. Григорьева Р.З. Безопасность продовольственного сырья
и продуктов питания. Уч. Пособие. Кемерово, 2004. – С. 21-26.
3. Смирнов У.С., Зайченко
Ф.М., Рубежняк И.Г. Микотоксины:
Фундаментальные и прикладные аспекты. //Современные проблемы токсикологии. —
2000. — №1. — С. 2-12.